慢病毒载体作为一种基因载体工具,可以将基因转入细胞,且不影响宿主细胞本身基因组的正常功能。慢病毒还能够感染非分裂细胞,使其为科研以及医疗领域所亲睐。借助慢病毒感染系统,进行细胞内外源基因的过表达以及RNA干扰来研究一些基因的功能,已经逐渐成熟。借助慢病毒感染系统感染非分裂细胞的能力,将RNA干扰用于肿瘤的治疗也在医疗领域取得了一系列成就。鉴于慢病毒载体系统的诸多优势,本课题主要对慢病毒感染条件进行优化,并将其用于外源基因的过表达和RNA干扰之中。该过程需要优化慢病毒包装的条件:转染质粒及转染试剂的比例、转染细胞的数量、细胞预处理时间、表达时间等,进而稳定高效地获得有感染能力的病毒。其次,我们以GFP作为报告蛋白,优化慢病毒感染条件:细胞密度,Moi,感染与表达时间等,为胞内蛋白的过表达和RNA干扰的进行奠定了基础。通过上述条件的优化,得到了稳定有效的慢病毒感染系统。利用该系统将杀鱼爱德华氏菌T6SS效应蛋白EvpP转入J774A.1细胞,最终证明,细菌与细胞共孵育时,该蛋白对J774A.1细胞炎症小体激活有抑制作用。借助慢病毒感染系统,通过RNA干扰技术,对CW-2及MDA-MB-468细胞表面受体ADORA1蛋白的表达进行有效干扰,研究了 AMP对癌细胞的靶向功能,并证明该功能与adora1基因相关。