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背景酗酒是当今社会普遍存在的问题,研究表明,这种行为严重影响人类身体健康,不仅有损个人身心健康,对家人和社会都会产生不良影响。尤其是女性孕期饮酒会严重影响胎儿的生长发育,严重者发生胎儿酒精综合征(fetal alcohol syndrome, FAS),中枢神经系统失调便是其特征表现之一。基本节律性呼吸起源于延髓呼吸中枢,而稳定的节律性呼吸是机体生存的根本条件。延髓呼吸中枢部位的病变是临床工作中的常见病与多发病,也是常见的致死因素。酗酒引起的子代中枢性呼吸异常越来越多见,因此,研究孕期酒精暴露对子代延髓呼吸中枢功能的作用及其机制对相关疾病的预防和治疗有重要的意义。目的使用电生理方法研究腺苷A2A受体在孕期酒精暴露抑制子代延髓呼吸中枢基本节律性呼吸放电(rhythmic respiratory discharge activities, RRDA)中的作用,使用Western blot和qRT-PCR检测延髓呼吸中枢面神经后核内侧区神经元腺苷A：A受体(adenosine A2A receptor)和受体mRNA表达的变化,探讨腺苷A：A受体在孕期酒精暴露中所致子代呼吸抑制中的作用机制,为相关疾病的预防和治疗提供实验基础。方法SPF级Sprague-Dawley大鼠,随机分为对照组和酒精暴露组。对照组大鼠常规饲养；酒精暴露组大鼠除常规饲养外,自合笼前一个月起至哺乳期给予8%的酒精为唯一饮用水。使用产下0-3天的新生大鼠,雌雄不拘。1.记录能反映延髓中枢呼吸功能的新生大鼠离体延髓脑片的RRDA,研究腺苷A：A受体激动剂CGS21680和腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261对孕期酒精暴露新生大鼠和对照大鼠延髓RRDA的作用有克区别,分析腺苷A：A受体是否参与孕期酒精暴露对子代延髓呼吸中枢的抑制作用。2.采用Western Blot技术检测腺苷A2A受体水平,研究孕期酒精暴露对子代新生大鼠延髓而神经后核内侧区呼吸神经元腺苷A：A受体表达的作用。3.采用qRT-PCR技术检测腺苷A2A受体mRNA水平,研究孕期酒精暴露子代鼠延髓面神经后核内侧区神经元内腺苷A2A受体mRNA表达的作用。结果1.对照组和酒精暴露组脑片放电60min内稳定无衰减,实验模型稳定可靠。酒精暴露组脑片放电弱于对照组(以对照组为100%,实验组20min时TI87.67±3.28%、IA90.57±4.81%、RC89.93±4.42%)。腺苷A2A受体激动剂CGS21680对酒精暴露组和对照组脑片放电都有兴奋作用,对照组兴奋效果强于酒精暴露组(实验组变化率分别为11.54±0.65%、8.22±0.71%、10.34±0.63%；对照组为：18.05±0.60%、16.41±0.62%、18.68±0.54%)；腺苷A2A受体拮抗剂SCH58261对酒精暴露组和对照组脑片放电都有抑制作用,对照组抑制效果强于酒精暴露组(实验组变化率分别为11.10±0.53%、14.62±0.62%、12.37±0.61%；对照组为：17.26±0.65%、18.91±0.62%、18.72±0.60%)。实验结果提示腺苷A2A受体参与孕期酒精暴露对子代延髓呼吸中枢抑制作用,孕期酒精暴露降低腺苷A2A受体功能。2. Western Blot实验结果显示,酒精暴露组延髓面神经后核内侧区神经元腺苷A2A受体水平表达下调,孕期酒精暴露降低腺苷A2A受体蛋白数量(对照组1.011±0.107、实验组0.637±0.080)。3. qRT-PCR实验结果显示,酒精暴露组延髓面神经后核内侧区神经元腺苷A2A受体mRNA水平下降,孕期酒精暴露降低腺苷A2A受体mRNA水平(对照组1.015±0.134、实验组0.642±0.059)。结论1.孕期酒精暴露抑制新生大鼠延髓脑片RRDA、抑制延髓呼吸功能。2.通过下调腺苷A2A受体和受体mRNA表达而降低腺苷A2A受体对RRRDA的调节作用可能是孕期酒精暴露抑制子代延髓中枢呼吸功能的机制之一。