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目的:鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma,NPC）是一种特殊的头颈部肿瘤,主要分布于东南亚。鼻咽癌首选放射治疗,转移以及放射耐受的鼻咽癌也会配合化学治疗。近年来研究发现传统的抗疟疾药青蒿素及其衍生物具有多重抗肿瘤效应。有报道青蒿素主要活性成分双氢青蒿素（Dihydroartemisinin,DHA）具有抗鼻咽癌作用,但其机制尚未完全阐明。我们前期研究发现鼻咽癌CLC-3氯通道蛋白表达增加,通道活性增强。基于此,本课题拟将探讨:1)CLC-3氯通道是否为DHA选择性抗鼻咽癌（CNE-2Z）细胞的潜在靶点?2)DHA通过CLC-3氯通道诱导CNE-2Z细胞凋亡的机制。为研发以CLC-3氯通道为靶点的抗肿瘤药物和扩大DHA临床应用提供实验依据。方法:1)实验对象:人低分化的鼻咽癌CNE-2Z细胞和正常的鼻咽上皮NP69-SV40T细胞;2)MTT实验检测细胞增殖抑制率;3)AnnexinV-PI双染法检测细胞的凋亡率;4)动态图像分析法检测细胞容积大小;5)免疫印迹实验（Western blot）检测细胞的Cleaved-Caspase 3和CLC-3的蛋白表达;6)膜片钳实验（全细胞记录法）检测细胞的氯电流;7)MQAE（氯离子探针）通过荧光酶标仪检测胞内氯离子荧光;8)Fluo-3（钙离子探针）通过细胞流式仪检测胞内钙离子荧光;9)数据用均数+标准误表示,采用SPSS12.5软件对实验数据进行统计与分析。结果:1.DHA抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖。DHA作用于CNE-2Z细胞24、48小时,随着作用浓度与时间的增加,细胞的增殖抑制率也增高。经计算,DHA的IC50为36.4μmol/L;相比于正常的NP69-SV40T细胞,DHA对其毒性反应较低,且IC50为189.7μmol/L。因此,本课题选择与IC50值较近的40μmol/L作为后续的实验浓度。2.DHA诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡。DHA作用CNE-2Z细胞24、48小时的凋亡率分别为（14.14±1.75）%和（35.41±0.98）%;而作用于正常的鼻咽上皮NP69-SV40T细胞,凋亡率仅为（1.32±1.05）%及（6.24±1.84）%。氯通道阻断剂（DIDS、NPPB）及CLC-3 siRNA可抑制DHA诱导的CNE-2Z细胞凋亡。3.DHA促进鼻咽癌CNE-2Z细胞的Cleaved-caspase 3蛋白表达,而对于正常的鼻咽上皮NP69-SV40T细胞Cleaved-caspase 3蛋白的表达没有明显的变化。4.DHA选择性诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞CLC-3蛋白表达增加。CLC-3蛋白在1.5小时开始增加,6小时表达最高,12-24小时蛋白表达减少（但高于正常对照组）,而对于正常的鼻咽上皮NP69-SV40T细胞CLC-3蛋白的表达没有明显的变化。5.DHA选择性激活鼻咽癌CNE-2Z细胞的氯电流。在10.55±3.88min左右时,DHA可激活细胞的氯电流,持续作用27.82±4.06min后,电流达到平台期。在±80电压钳制下,最大的激活电流分别为（40.09±2.54）pA/pF及（-26.52±1.50）pA/pF。对于正常的鼻咽上皮NP69-SV40T细胞,DHA处理40min后仍不能激活氯电流。氯通道阻断剂（DIDS、NPPB）及CLC-3 siRNA能够抑制DHA激活CNE-2Z的氯电流。6.DHA选择性诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞氯离子外流。DHA作用CNE-2Z细胞15min后,胞内氯离子荧光减少了（29.67±6.22）%;处理30min后,胞内氯离子外流达到稳定,其胞内氯离子荧光降低了（35.65±3.78）%。7.DHA诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡性容积缩小—Apoptotic volume decrease（AVD）。DHA灌流CNE-2Z细胞5min后,可观察到细胞容积变小,持续作用120 min后,细胞容积缩小了（15±4.58）%。CLC-3 siRNA及氯通道阻断剂DIDS可抑制DHA诱导的AVD。8.DHA诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞的钙离子增加。DHA作用CNE-2Z细胞6小时后,胞内钙荧光相对值增加了（77±18.52）%,处理24小时后,胞内钙离子荧光相对值增加了（207±36.78）%。CLC-3 siRNA能够抑制DHA诱导CNE-2Z细胞内的钙荧光增加,钙离子荧光相对值分别从（307.76±40.53）%降低到（120.17±20.96）%。结论:1.DHA选择性地抗鼻咽癌CNE-2Z细胞作用是与CLC-3氯通道活性以及蛋白表达相关;2.DHA激活鼻咽癌CNE-2Z细胞氯电流,诱导凋亡性容积减小（AVD）发生及胞内钙离子的积累,从而导致CNE-2Z细胞凋亡。