【摘 要】
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非酒精性脂肪肝或代谢相关脂肪性肝病（NAFLD或MAFLD,下称MAFLD）全球发病率上升,但其发病机制尚未完全阐明,也尚无特效药物治疗。自噬被证实在肝细胞脂质沉积中起了重要作用。支链脂肪酸（BCFA）是食物中的活性成分,具有改变生物膜流动性、抗肿瘤、抗癌和抗炎等作用,但BCFA在肝细胞脂质沉积中的作用机制暂不清楚。本研究的目的在于探究BCFA在自嗜介导的肝细胞脂肪沉积中的作用,以期为抗MAFLD
【基金项目】
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长沙市杰出创新青年项目（kq1802014）；
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非酒精性脂肪肝或代谢相关脂肪性肝病（NAFLD或MAFLD,下称MAFLD）全球发病率上升,但其发病机制尚未完全阐明,也尚无特效药物治疗。自噬被证实在肝细胞脂质沉积中起了重要作用。支链脂肪酸（BCFA）是食物中的活性成分,具有改变生物膜流动性、抗肿瘤、抗癌和抗炎等作用,但BCFA在肝细胞脂质沉积中的作用机制暂不清楚。本研究的目的在于探究BCFA在自嗜介导的肝细胞脂肪沉积中的作用,以期为抗MAFLD药物或保健食品的研发奠定实验基础。体外培养小鼠肝细胞Am L-12,用0.6 mmol/L棕榈酸诱导致使肝细胞脂肪沉积,再用0、0.2、0.4 mmol/L iso-15:0（BCFA的一种）和/或自噬抑制剂3-MA处理细胞,油红O染色和试剂盒观测胞内甘油三酯（TG）含量,再用Western Blotting检测自噬相关因子P62、LC3B、Atg5、Atg7水平,用q PCR检测脂类代谢关键因子SREBP-1c、PPARα、ACC、FAS、CPT1和ACO等的m RNA表达水平。结果显示:（1）与空白对照相比,棕榈酸诱导显著提高了胞内TG水平;与棕榈酸诱导组相比,而iso-15:0处理降低了胞内TG水平,且iso-15:0介导的TG下降可被3-MA所阻断。（2）棕榈酸处理肝细胞P62蛋白相比其他组表达显著上升,LC3B和Atg7则显著下降;与棕榈酸诱导组相比,iso-15:0处理组Atg7和Atg5的蛋白水平显著升高,LC3B蛋白水平与棕榈酸处理组相比显著升高。（3）与空白对照组相比,棕榈酸组脂肪酸合成关键因子SREBP-1c、ACC、FAS m RNA丰度显著升高,脂肪分解关键因子PPARα、ACO和CPT1的m RNA丰度显著下降;与棕榈酸组相比,iso-15:0处理显著下调SREBP-1c、ACC、FAS的m RNA表达,并上调PPARα、ACO和CPT1的m RNA表达。研究结果表明,iso-15:0在体外有缓解脂肪沉积的作用,此作用是通过增强细胞自噬、上调脂肪酸分解基因表达和下调脂肪酸合成基因表达而实现的。
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