论文部分内容阅读
目的:研究蛋白酶体抑制剂MG-132对人慢性粒细胞白血病急性红白血病变细胞株K562的干预作用,为白血病的治疗提供可靠的理论依据。
方法:分组实验分为对照组和实验组,对照组为等量培养基组(0μmol/L MG-132组),实验组按照不同剂量的MG-132分2、4、8、16、32μmol/L五个剂量组,各组再以24、48、72、96 h四个时间点进行实验。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的MG-132在不同时间(24、48、72、96 h四个时间点)对K562细胞株增殖的影响 ; 采用免疫细胞组织化学法检测不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的MG-132在不同时间(24、48、72、96 h四个时间点)对K562细胞株中的核因子-KB(NF-KB)活性的影响。采用免疫细胞组织化学法检测不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的MG-132在不同时间(24、48、72、96 h四个时间点)对K562细胞株中的糖皮质激素受体(GR)表达的影响。采用流式细胞术(FCM)检测不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的MG-132在不同时间(24、48、72、96 h四个时间点)对K562细胞株凋亡的影响。
结果: MTT:不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的 MG-132干预24、48、72、96 h后,K562细胞株的抑制率表现为对时间和剂量的依赖性,实验组明显高于对照组,以MG-132剂量为16μmol/L、干预72 h时,抑制率最高,为(63.33±1.52)% 。免疫细胞组织化学法:不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的 MG-132干预24、48、72、96 h后,K562细胞株中的NF-KB的表达水平表现为对时间和剂量的依赖性,实验组明显低于对照组,以MG-132剂量为32μmol/L、干预96 h时,NF-KB表达水平最低,为50.59±1.91。免疫细胞组织化学法:不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的 MG-132干预24、48、72、96 h后,K562细胞株中的GR表达水平,实验组明显高于对照组,以MG-132剂量为16μmol/L、干预72 h时,GR的表达水平最高,为89.21±3.49。流式细胞术:不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的 MG-132干预24、48、72、96 h后,K562细胞株的凋亡率表现为对时间和剂量的依赖性,实验组明显高于对照组,以MG-132剂量为32μmol/L、干预48h时,凋亡率最高,为(21.37±2.02)%。
结论:本实验条件下(1)MG-132可以抑制K562细胞的生长。(2)MG-132可以下调K562细胞中NF-KB的表达。(3)MG-132可以上调K562细胞中GR的表达。(4)MG-132可以诱导K562细胞的凋亡。(5)MG-132抑制K562细胞的生长及诱导其凋亡的机制可能是通过下调NF-KB、上调GR的表达来实现的,并表现出对时间和剂量的依赖性。