电针委中穴对大鼠腰多裂肌损伤后TGF-β1、CTGF、Vimentin表达的影响

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腰痛是临床上比较常见的症状之一,不仅发病率高,而且也容易复发,通常情况下,患者可自觉腰部的疼痛、麻木、乏力等感觉,主要表现为一侧或两侧的疼痛不适,一般为局限性的异常感觉,但是严重者除了腰部不适外,也会出现下肢放射性的疼痛感。腰痛作为临床常见症状,并不是仅仅出现在疼痛科、针灸科和骨科,其它科室的疾病也会引起腰部的不适感,比如妇科和泌尿外科。“委中”穴是足太阳膀胱经上的穴位,其所在的经脉循行和经筋循行的路线均经过人体的腰背部,临床上选用“委中”穴来治疗腰腿痛,体现了“经脉所过,主治所及”的理论;且“委中”穴为膀胱经的下合穴,选用“委中”穴治疗腰痛,可以体现“合治内腑”的理论;《四总穴歌》中“腰背委中求”的记载,是对腰痛病选用“委中”穴进行治疗的经验总结,充分体现了古人的智慧。多裂肌位于脊柱两侧的深部位置,附着在脊柱旁,是核心肌群的重要组成部分之一,腰部多裂肌在功能状态正常的情况下,能够协助腰部完成侧屈、前屈、后伸、旋转活动,是保持机体腰部正常运动的重要肌肉之一,能够维持腰部及脊柱的稳定性。腰部多裂肌受到损伤或外力刺激,功能状态发生异常时,腰部脊柱及其周围的筋膜、小关节、韧带等组织就会出现力量失衡,损伤严重时,腰部便会出现明显的疼痛感,遇到挤压神经时,便会出现下肢放射性疼痛。可知,腰部多裂肌与腰痛的发生密切相关,因此探索腰部多裂肌损伤以后的修复情况,对于腰痛的治疗具有重要的指导意义。转化生长因子TGF-β1在肌肉再生和肌肉纤维化中发挥着重要的作用,结缔组织生长因子CTGF是其下游因子,TGF-β1能够促进结缔组织CTGF活跃,而结缔组织增多会直接导致器官和组织的纤维化产生,以往研究表明,TGF-β1能够诱发肌肉纤维化,促进成纤维细胞增生,因此TGF-β1和CTGF的过度表达,都不利于肌肉损伤后的修复,严重时会促使组织形成瘢痕。Vimentin波形蛋白,它是肌肉生长的重要指标,在肌肉再生早期发挥着重要的作用,能够引发肌卫星细胞的激活,从而促进组织损伤修复。研究目的本研究通过观察多裂肌损伤后的组织形态学变化,以及TGF-β1、CTGF、Vimentin的表达变化,来探讨电针“委中”穴对大鼠腰多裂肌损伤后肌纤维再生和致纤维化相关因子的影响,为临床针灸治疗腰痛提供实验数据支持。研究方法将54只雄性8周龄SD大鼠,分成空白组、模型组、电针委中穴组,每组各18只,再将每组随机分成治疗1d、3d、7d三个时间点,每个时间点各6只大鼠。空白组不进行任何处理;电针委中穴组进行电针治疗,每天治疗1次,每次持续20min;模型组与电针委中穴组同步固定,但不采取治疗措施。通过Masson染色法观察各组大鼠多裂肌组织形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠TGF-β1、CTGF、Vimentin的表达情况,Western-blot法检测各组大鼠TGF-β1的蛋白表达情况。研究结果(1)Masson染色结果:空白1d、3d、7d组可以观察到大量被红染的肌纤维,它们整齐的分布,排列着;模型组可以见到大量被蓝染的胶原纤维,其间分布着少许红色的肌纤维;电针委中穴组与模型组相比,可以见到红染的肌纤维,相对而言,被蓝染的胶原纤维则较少。(2)免疫组化法检测结果TGF-β1:治疗1d时,与空白组相比,模型组与电针委中穴组的TGF-β1降低(P<0.01,P<0.01);与模型组比较,电针委中穴组有下降趋势(P<0.01)。治疗3d时,模型组与电针委中穴组的表达高于空白组(P<0.01,P<0.01);与模型组相比,电针委中穴组的表达减少(P<0.01)。治疗7d时,模型组与电针委中穴组的表达高于空白组(P<0.01);电针委中穴组的表达比模型组减少(P<0.01)。CTGF:治疗1d时,模型组比空白组的表达增加(P<0.01),电针委中穴组比空白组的表达有所上升(P<0.05);与模型组比较,电针委中穴组的表达减少(P<0.05)。治疗3d时,模型组的表达量高于空白组(P<0.01),电针委中穴组与空白组之间差异无统计学意义(P>0.05);治疗7d时,模型组与电针委中穴组表达量高于空白组(P<0.01,P<0.01),而电针委中穴组表达量低于模型组(P<0.01)。Vimentin:治疗1d时,模型组与电针委中组的表达量高于空白组(P<0.01,P<0.01);与模型组比较,电针委中穴组有所增加(P<0.01)。治疗3d时,与空白组比较,模型组与电针委中穴组表达增加(P<0.01,P<0.01);电针委中穴组比模型组更高(P<0.01)。治疗7d时,模型组与电针委中穴组表达量高于空白组(P<0.01,P<0.01),电针委中穴组表达量高于模型组(P<0.05)。(3)Western-blot法检测结果TGF-β1治疗1d时,与模型组相比,电针委中穴组表达下降(P<0.05);治疗3d时,与空白组比较,电针委中穴组表达量降低(P<0.05);治疗7d时,各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。研究结论(1)电针“委中”穴能够降低TGF-β1和CTGF的表达量,同时增加Vimentin的表达量,这是促进骨骼肌损伤修复的机制之一。(2)电针通过抑制纤维化因子的表达,提高肌纤维再生的能力,达到治疗大鼠骨骼肌损伤修复的目的,其效果最明显可能出现在第3天。
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