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目的:1.探索尸体自生醇、醛的种类;2.优化尸体肝脏和肌肉中自生醇、醛类顶空进样气相色谱检测方法;3.探索尸体肝脏和肌肉腐败产生乙醇的规律;4.探索尸体肝脏和肌肉中自生乙醇的含量与其他自生醇、醛类之间的关系。方法:1.死后腐败大鼠模型:SD大鼠（n=158）禁食12小时,颈椎脱臼法处死,尸体置于20℃、50%恒温恒湿箱内。于第0-20天,每隔24小时取肝脏和大腿肌肉。2.自生醇类、醛类的检测:（1）样品前处理:待测组织0.5g加水1.5ml匀浆5min,5000rpm离心5min,取100μl（HS-20+GCMS-QP2020NX顶空气相色谱-质谱检测）或200μl（7820A顶空气相色谱检测）上清液于10ml顶空瓶中,加入内标物0.04mg/ml叔丁醇500μl,混匀后1μl进样。（2）顶空气相色谱-质谱检测条件:HS-20+GCMS-QP2020NX顶空气相色谱质谱仪,日本岛津公司;色谱条件:平衡温度:80℃;平衡时间:10min;色谱柱:SH-Rtx-624（60m×0.25mm ID×1.4μm）;分流比:20:1;控制模式:恒线速度;线速度:67.5cm/s;柱温程序40℃（3min）-15℃/min-180℃（2min）;载气:氮气,流速30ml/min;质谱条件:电离源:EI;电子束能量:70e V;离子源温度:200℃;接口温度:220℃;采集方式:scan。（3）顶空气相色谱检测条件:Agilent 7820A顶空气相色谱质谱仪,美国安捷伦公司;色谱柱:DB-ALC（30m×320.00μm×1.8μm）;柱温程序40℃（3min）-75℃/min-60℃/（1.5min）-75℃/min-75℃（3min）;载气:氮气,流速7ml/min;进样口温度:150℃;检测器:FID,温度250℃。顶空瓶加热箱温度:65℃;样品瓶加热平衡时间18min。记录峰面积,计算各待测物与乙醇的峰面积比,通过标准曲线法计算各待测物含量。3.SPSS软件建立及验证回归统计模型:回归分析被用来模拟尸体产生的乙醇和其他自生醇类之间的相关性。用曲线回归分析和多元线性回归分析实验数据,将因变量（乙醇）与自变量（死亡时间间隔、其它自生醇类或醛类）的关系以回归模型的形式呈现。结果:1.大鼠尸体自生醇、醛类的种类研究:结果表明乙醛,乙醇,甲醇,正丙醇,正丁醇,异戊醛,正戊醇,2-甲基1-丁醇在腐败过程中产生。它们作为乙醇的类似化合物,产生过程与乙醇有或大或小的联系。因此,结合文献与GC-MS的定性分析结果,选定乙醛（Acetaldehyde）,乙醇（Ethanol）,1-丙醇（1-Propanol,正丙醇）,2-丙醇（2-Propanol,异丙醇）,1-丁醇（1-Butanol,正丁醇）,3-甲基-1-丁醛（3-Methyl-butyraldehyde,异戊醛）,2-甲基-1-丁醇（2-Methyl-butanol）这七种物质作为本研究的目标待测物。2.确定大鼠尸体自生醇、醛类的检测方法:以《车辆驾驶人员血液、呼气酒精含量阈值与检验标准（GB/T19522-2010）》为基准,增加GC循环时间,采用程序升温的方式使这些化合物能够分离且出峰,峰形良好且互不干扰。七种物质标准工作曲线的拟合度均在0.999以上,回收率均在80%-120%之间,精密度RSD均小于6%。3.大鼠尸体自生醇、醛类的规律探索:通过SPSS软件拟合出21个模型。（1）大鼠死后组织中待测物的变化趋势:126只死后大鼠（0～20天,6只/天）,在肝脏中,乙醇、乙醛、正丙醇、正丁醇、异戊醛等物质检出率比较高,而在骨骼肌中,仅有乙醇和正丙醇检出率较高。乙醇含量的变化趋势是先升高,后降低。（2）死后自生醇类及PMI模型的建立:肝脏中的乙醇、乙醛、1-丙醇、3-甲基丁醛,肌肉中的乙醇可与PMI形成二次回归模型,建立了5个模型,均具有良好的拟合性,特别是肌肉中乙醇与PMI回归模型的R~2值达到0.936。以PMI为自变量,乙醇为因变量的二次模型的最高点即为本实验条件下尸体自生乙醇的最大值,肝脏中为20.32mg/100ml,肌肉中为21.77mg/100ml。表明在一定尸体条件下,尸体组织中乙醇产生存在最大值。（3）死后乙醇及其它乙醇同系物含量模型的建立:乙醇含量与肝脏中的乙醛、1-丙醇和3-甲基丁醛以及肌肉中的1-丙醇具有良好的相关性。因此,选择乙醛、1-丙醇和3-甲基丁醛作为死后乙醇定量分析的参考。在肝脏中,以乙醇为因变量,乙醛、1-丙醇、3-甲基丁醛作为自变量建立回归模型。在肌肉中,以1-丙醇为自变量,乙醇为因变量建立回归模型。合计建立了16个回归模型。（4）乙醇-乙醛关系:本研究中在生前未摄入乙醇的情况下,乙醛也可以在腐败的尸体中产生,且与乙醇的产生具有一定的关联性。因此,仅以生物检材检出乙醛来判定生前摄入乙醇的方式值得重新考虑。（5）乙醇/正丙醇的比值:本次实验的大鼠死前均未摄入乙醇。在肝脏组织中（n=114）,83.3%的大鼠乙醇/正丙醇小于20,这些大鼠的腐败时间均在第2-17天（第0-1天的肝脏均未检出乙醇）;16.7%的大鼠乙醇/正丙醇大于20,这些大鼠的腐败时间均在第18-20天。因此我们认为,在死前不摄入乙醇的情况下,死后早期阶段肝脏数据仍符合乙醇/正丙醇<20这个理论,但死后晚期阶段时应谨慎考虑。而在肌肉中（n=109）,92.7%的大鼠乙醇/正丙醇大于20。这个比值绝大部分集中在20-40之间。因此我们认为在肌肉中乙醇/正丙醇比值理论的应用需要重新考虑。同时,本次实验提供了乙醇与正丙醇更详细的回归模型供参考。4.尸体自生醇、醛类的规律验证:在现有试验条件下,基于死亡时间估算大鼠尸体自生乙醇偏差小于30%（模型*1和*5）,具有一定的可行性。一元线性回归（模型#1,#4,#7,#14）,和多元线性回归模型（模型#10,#11,#12,#13）中,乙醇的平均偏差约为30%,,这表明乙醛、1-丙醇和3-甲基丁醛来估计尸体中乙醇产生量具有一定的潜力。结论:1.本研究优化了肝脏和肌肉中自生醇类和醛类（乙醇、乙醛、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异戊醛、2-甲基1-丁醇）顶空气相色谱法,具有灵敏度高,重复性好的特点,可以用于相关法医学案件的鉴定。2.腐败自生乙醇含量的时序性变化呈现出先升高,后降低的形势,出现了一个峰值。乙醇能够与PMI形成一个拟合度较好的二次函数,二次函数的最高点即为在一定条件下大鼠尸体内产生乙醇的最大值。3.腐败乙醇的产生与乙醛、正丙醇、异戊醛具有一定的关联性,可以通过乙醛、正丙醇、异戊醛等物质的含量对腐败自生乙醇的含量进行估算。