【摘 要】
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背景:髓母细胞瘤(Medulloblastoma)是一种小脑神经上皮肿瘤,是最常见的儿童中枢神经系统肿瘤,70%患者生存期能达到5年,但是也有一部分高危患者常发生转移,75%的这类患者生存
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背景:髓母细胞瘤(Medulloblastoma)是一种小脑神经上皮肿瘤,是最常见的儿童中枢神经系统肿瘤,70%患者生存期能达到5年,但是也有一部分高危患者常发生转移,75%的这类患者生存期不超过5年。全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA),是目前用于临床肿瘤化学治疗及预防较为成熟的维甲类药物,它具有广泛的抗增殖及促分化活性,能够抑制多种不同类型肿瘤细胞的恶性生长。目的:本文主要探讨ATRA对髓母细胞瘤细胞系MB39细胞增殖生存的影响及其作用途径。方法:用ATRA处理MB39细胞,通过CCK-8实验绘制细胞生长曲线以考察ATRA对细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术(FITC/PI双标记实验和caspase-3标记实验)检测ATRA处理后MB39细胞凋亡状况;Western blotting检测IRS-1,PI3K,Akt,p-Akt,NF-κB,IKKα,IκBα以及Bax,Bcl-2的表达变化情况。尝试体外培养分离MB39干细胞,细胞免疫荧光技术检测鉴定干细胞,并进一步研究ATRA对于MB39干细胞的影响。结果:MB39细胞经ATRA给药处理后,细胞增殖受到明显抑制。光镜观察到诱导前的MB39细胞呈正常的成纤维细胞形态,而诱导后的MB39细胞表现明显的凋亡特征,caspase-3表达明显上升。Western blotting检测ATRA处理24小时后IRS-1,PI3K,Akt,p-Akt,NF-κB,Bcl-2的表达显著下调;IKKα,IκBα,Bax表达增强。MB39细胞系经诱导培养,能够获得干细胞特性的一小部分细胞;ATRA可以有效阻碍MB39细胞成球悬浮生长,并且对已形成的肿瘤球的生长有抑制作用。
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