论文部分内容阅读
Intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1)编码一个细胞表面糖蛋白,是一种细胞间粘附分子,它多在内皮细胞和免疫细胞中表达。ICAM-1的配体是白细胞粘附分子CD18家族中的两个成员:即淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte function-associated antigen-1, LFA-1)(CD11a/CD18)和巨噬细胞抗原复合体-1(Mac-1)(CD11b/CD18)。在炎症反应和肿瘤细胞的转移过程中,ICAM-1介导的细胞黏附发挥着极其关键的作用。有研究发现,病理状态下,释放的一些细胞因子如IFN-γ, IL-1和TNF-α等都可以增加ICAM-1的表达;也有研究发现,在内皮细胞中NF-κB促进ICAM-1的转录调控。但是目前关于ICAM-1基因的具体表达调控机制仍然不明确。本实验室前期研究发现在前列腺肿瘤细胞系DU145中E2F1和ICAM-1的表达具有相关性。因此本研究选择前列腺细胞系PC3和宫颈癌细胞系Hela为实验材料,进一步研究E2F1和ICAM-1的表达之间的联系。我们利用RNA干扰技术,在这两种细胞系中分别瞬时敲低E2F1的表达后,发现ICAM-1的mRNA水平和蛋白表达水平均有所上升。另外,在PC3细胞中瞬时高表达E2F1可使ICAM-1的表达水平显著下降。这表明在这两种细胞中,E2F1可能负调控ICAM-1的表达。本课题进一步在PC3细胞系和Hela细胞系中对ICAM-1的启动子进行了分析,研究了ICAM-1启动子上的两个潜在的NF-κB结合位点。通过双报告基因检测分析发现,E2F1可能是通过与NF-κB的相互作用,利用ICAM-1启动子上的两个NF-κB结合位点,抑制了ICAM-1的转录。本课题研究验证了E2F1对ICAM-1的调控作用,并进一步探讨了E2F1调控细胞粘附分子ICAM-1的分子机制。鉴于ICAM-1在肿瘤的转移浸润中的重要作用,我们的研究提示E2F1可能是一个重要的抑制肿瘤转移的药物靶点。