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冷凝固物是啤酒酿造过程中,在零储工段析出并沉淀下来的蛋白质-多酚物质的复合物,其蛋白质的含量为50%左右,且无毒、无刺激性气味、无致病菌,富含17种氨基酸。在实际生产过程中,冷凝固物基本上全部被排放掉,其COD值在1.3×105mg/L左右,是啤酒厂废水COD的主要贡献者。 目前,国内对啤酒废凝固物的资源化利用几乎是空白,我们首次对以啤酒冷凝固物为原料制备氨基酸的工艺进行了研究。发现利用啤酒冷凝固物制备氨基酸同目前常用的其它水解法制备氨基酸的原料相比,在缩短反应时间、节约能耗、简化原料预处理、降低生产成本等方面有它独特的优越性;分离冷凝固物后的废液COD值由1.3×105mg/L降至4600mg/L。 本论文首先对碱溶酸沉法提取啤酒冷凝固物中的蛋白质进行了研究,结果表明,NaOH溶液浓度为0.1mol/L,料液比1:10,溶液温度为60℃,浸提时间60min,蛋白提取率88.15%。将从冷凝固物中提取的粗蛋白进行水解与将冷凝固物直接水解的实验结果进行比较发现,冷凝固物中所含杂质对水解反应影响不大,且蛋白提取工艺较复杂,提取过程会使氨基酸有较大损失,所以决定采用冷凝固物直接进行水解的工艺路线。 对冷凝固物在水解过程中混合氨基酸浓度的定量检测条件进行了研究,结果表明,在溶液pH5.8、氨基酸浓度约为10~40μg/mL、100℃水浴加热20min的条件下,以冷凝固物的完全水解液作为标准溶液,采用茚三酮比色法测定水解液中混合氨基酸的浓度,加标回收率为90%~110%,标准曲线的线性相关系数为0.9994,解决了由于不同氨基酸与茚三酮结合产物的呈色度不同而导致的测定结果误差较大的问题。 分别采用传统加热法和微波辐射法对啤酒冷凝固物的水解工艺进行了研究,并确定出最佳工艺条件。传统水解法的最佳工艺条件为:温度110℃,料液比1:10,反应时间8h,HCl浓度8mol/L,氨基酸积累率75.24%;微波辐射法的最佳工艺条件为:HCl溶液浓度为6mol/L,料液比为1:25,微波辐射功率为200W,微波连续辐射时间为30min,氨基酸积累率为82.60%。结果表明,微波辐射法在反应时间上较传统加热法有较大优势。 采用单因素试验及正交试验对冷凝固物水解液的脱色工艺进行了优化,得出脱色的最佳工艺条件为:脱色温度85℃,脱色时间60min,活性炭投加量为2.0%,水解液pH2.0。在此条件下,A400为0.078。对离子交换法分离混合氨基酸的工艺进行了研究,结果如下:上样液氨基酸浓度6.0mg/mL,上样液pH1.0~1.5,上柱流速1.0mL/min;以0.05mol/L的HCl溶液为洗脱剂,洗脱流速0.5mL/min。利用该工艺分离出谷氨酸,可得到含量约为40%的谷氨酸粗品。