稻瘟病菌Rho2同源蛋白的功能分析

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小G蛋白是真核生物细胞信号转导过程中重要的蛋白超家族,可分为8个不同的家族:Arf、Ran、Rab、Rho、Ras、Sar1、Mitochondrial Rho、Roc small GTPases domain,拥有一个共同的结构保守的GTP结合结构域。Rho家族GTP酶主要调控细胞骨架重组。真菌中,Rho1主要调控细胞的形态建成,Rho2、Rho3以及Rho4对真菌的细胞分化和极性生长有影响。本研究通过生物信息学的方法,利用相应的计算机软件及数据库,对稻瘟病菌Rho2蛋白氨基酸序列进行分析和预测。对其理化性质、蛋白结构域、同源性、蛋白基序(motif)搜索和酶切位点预测以及蛋白序列系统演化关系做了详细的分析。进一步通过构建基因敲除突变体研究基因功能。MgRho2基因敲除突变体产孢量正常,菌落生长与野生型相比无明显差异,分生孢子和菌丝隔膜无变化,但是分生孢子的附着胞形成相对滞后于野生型,而随着时间的延长,分生孢子附着胞的形成与野生型达到相同的水平。洋葱表皮侵染实验表明,MgRho2基因敲除突变体能够产生正常的侵入栓侵入洋葱表皮,但是相对于野生型,侵入栓形成率较低,这与分生孢子的附着胞形成延迟相对应。将敲除突变体接种水稻CO39,及对大麦叶片进行离体接种,结果表明突变体发病情况与野生型没有差别。说明了不象其他Rho族成员在稻瘟病菌致病性中起重要调控作用,MgRho2主要影响该菌的附着胞发育,其机制有待进一步研究。
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