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目的：扩增纯化鉴定重组腺病毒基因治疗载体rAd-preS1，体外多种细胞实验检测其对肝细胞的嗜向性。方法：同源重组法构建了含HBV嗜肝性基因PreS1的重组腺病毒质粒prAd-PreS1，酶切鉴定后293细胞包装生成腺病毒rAd-preS1。聚合酶链反应PCR检测目的基因片段Pres1。经反复感染293细胞扩增获得较高滴度重组腺病毒，氯化铯经典法纯化病毒。用rAd-preS1体外分别感染人正常肝细胞（L02）、人肺癌细胞(A549)、人喉癌细胞（Hep2）检测其肝嗜向性，同时野生腺病毒rAd作为对照，观察各细胞中荧光蛋白GFP表达情况，比较各细胞内的病毒滴度值，同时用流式细胞术检测各细胞重组腺病毒的感染率，并进行统计学分析。结果：酶切鉴定证实rAd-preS1载体构建成功，扩增后病毒滴度1.15×10~9efu/ml。PCR结果示大小750bp目的基因片段。rAd-preS1转染多种细胞示L02细胞中绿色荧光蛋白表达明显强于A549、Hep2细胞，L02细胞的病毒滴度值高于A549、Hep2，有显著差异(P值均<0．01)，而A549、Hep2细胞间表达差异无统计学意义(P值>0．05)；对照组各细胞间表达差异无统计学意义(P值>0．05)。流式细胞术结果示人肝细胞感染率显著高于非肝细胞组。结论：携HBV PreS1重组腺病毒载体rAd-preS1对人肝细胞相对较强嗜向性，而对非肝细胞无明显效果，野生腺病毒无明显细胞嗜向性，为进一步研究肝脏疾病靶向基因治疗奠定了基础。