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背景和目的紫癜性肾炎(Henoch-Sch?nlein Purpura Nephritis,HSPN)是过敏性紫癜(Henoch-Sch?nlein Purpura,HSP)最严重的并发症之一,在儿童继发性肾小球疾病中最为常见。新月体的形成决定了HSPN病情的严重程度及预后。目前,新月体的诊断依赖于肾穿刺活检,此项检查不易在基层医院和儿童患者中普及推广。因此,筛选非创伤性的预示和监测HSPN新月体形成的标志物,并早期干预、阻断新月体形成具有重要意义。尿液具有取样方便、无创等优点,并且可以更加直观的反应肾脏病变。本研究采用蛋白质组学的方法,通过生物信息学分析,发掘HSPN新月体形成早期的尿生物标志物,并观察中西医结合治疗对其的影响。方法收集27例患儿尿样本,分为HSP组、HSPNⅡ型组(无新月体形成),HSPN III型组(有新月形成)3组。其中HSP患儿9例,HSPN(II型)患儿6例,HSPN(III型)患儿12例。尿液收集后2000r/min离心10分钟后取上清,所得尿样本用超速离心的方法提取尿蛋白,溶液内酶解后萃取肽段,用蛋白质组学高效液相色谱串联质谱(High Performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法进行质谱分析。利用Proteome Discover软件(Mascot2.3搜索引擎)进行数据库检索,确定蛋白的性质。采用labelfree相对定量的方法及intensity based absolute quantification(i BAQ)算法计算出相应蛋白的丰度。利用倍数分析法(ratio>2或<0.5)和秩和检验(p<0.05)的统计学方法,用HSPN(III型)组分别与HSP组、HSPN(II型)组比较筛选差异蛋白。结合Gene Ontology分析等生物信息学分析结果及文献查询,明确差异蛋白与新月体形成的关系。观察HSPN III组患儿治疗前后24h尿蛋白定量及血液中PT、TT、APTT、FIB、D-Dimer、FDP等凝血相关指标的变化。对比HSPN(III型)治疗前后差异蛋白的变化,观察凉血解毒活血法联合西医治疗对其的影响。结果在unique peptide&strict peptide≥1的条件下,HSP组共鉴定1476个蛋白;HSPN(II型)组共鉴定到962个蛋白;HSPN(III型)组共鉴定1156个蛋白。采用统计学方法,用HSPN(III型)组分别与HSP组、HSPN(II型)组比较,筛选到差异蛋白13个。其中上调蛋白7个,下调蛋白6个。上调蛋白为S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)、S100钙结合蛋白A4(S100 calcium binding protein A4,S100A4)、纤维蛋白原γ链(fibrinogen gamma chain,FGG)、纤维蛋白原β链(fibrinogen beta chain,FGB)、膜联蛋白A2(annexin A2,ANXA2)、基质金属蛋白酶7(matrix metallopeptidase 7,MMP7)、syndecan 1(SDC1)。通过Gene Ontology分析在上调蛋白中主要富集到2条生物学过程,分别为凝血及细胞外基质。中医凉血解毒法联合西医治疗能够降低HSPN(III型)患儿24h尿蛋白定量及血液中DDimer的含量。S100A9、S100A4、FGG、FGB、ANXA2、MMP7、SDC1,7种蛋白在治疗后变化不明显。结论1、尿中S100A9、S100A4、FGG、FGB、ANXA2、MMP7、SDC1,7种蛋白的升高可能作为HSPN新月体形成的生物标志物;2、炎症与纤溶系统可能参与了的肾小球基底膜(glomerular basement membrane,GBM)损伤与新月体的形成;3、中医凉血解毒法联合西医治疗能够有效减轻HSPN(III型)病变的临床症状,能够减少蛋白尿、改善高凝状态。