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目的探讨不同病理子宫颈组织TP63基因启动子区的DNA甲基化状态,TP63、survivin和RUNX2的表达以及RUNX2在两组子宫颈组织中TP63基因启动子DNA甲基化特异位点的结合情况,统计分析宫颈癌组织中TP63基因启动子DNA甲基化状态与临床病理参数之间的关系。方法选取2015年9月～2018年9月唐山市工人医院收治的因宫颈病变及其他良性疾病行手术治疗的标本共85例,严格按照标本的纳入及排除标准进行选取,所有标本均由实验人员与医院病理科医师共同确认病理分级和类型,其中宫颈癌患者40例(CC)和因子宫良性病变行全子宫切除术的患者45例(Control)宫颈组织。采用全基因组DNA甲基化分析(WGBS)和RNA sequence联合筛查CC和年龄相匹配的Control组织(各3例)的DNA甲基化度和m RNA表达;采用亚硫酸氢盐测序法(BSP)和实时定量PCR(q PCR)方法检测TP63基因启动子区DNA甲基化和RUNX2、TP63、survivin的m RNA表达;采用染色质免疫共沉淀技术(CHIP)检测RUNX2在宫颈组织中与TP63基因启动子的结合情况,并分析TP63基因启动子DNA甲基化状态与宫颈鳞癌病理参数的关系。结果1 WGBS和RNA-seq联合筛查发现TP63启动子DNA甲基化水平升高与其m RNA表达减少相关;2 BSP结果表明与Control组比较,CC组中TP63基因启动子区-688 Cp G位点DNA甲基化率显著升高,差异具有统计学意义(77.5%(31/40)vs.31.1%(14/45),P<0.05);3 q PCR结果显示与Control组比较,CC组中RUNX2和survivin的m RNA表达上调,TP63 m RNA表达下调(均P<0.05);4 Ch IP证实CC组TP63基因启动子区存在转录因子RUNX2结合序列,且-688Cp G位点DNA甲基化修饰影响RUNX2的结合。5相关性分析显示TP63基因DNA甲基化与肿瘤大小、病理分级和临床分期均相关(均P<0.05),而与患者的年龄无关(P>0.05)。结论1 TP63基因启动子DNA甲基化抑制其表达参与宫颈癌的发生发展。2TP63基因有望成为子宫颈癌患者临床评估的重要的预后指标以及宫颈癌治疗的重要分子靶点。图6幅;表5个;参148篇。