姜黄素对HL/ADR细胞的抑制作用和耐药逆转作用的研究

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目的:探索姜黄素对白血病耐药细胞HL<,60>/ADR的抑制作用和多药耐药逆转作用.方法:①取对数生长期细胞,设立不同姜黄素浓度(1.5μg/ml、3.0μg/ml、4.5μg/ml、6.0μg/ml、7.5μg/ml、9.0μg/ml)组和未加药组,应用MTT法检测姜黄素对HL<,60>/ADR细胞作用24h、48h、72h及对HL<,60>细胞作用72h的细胞毒作用;②荧光显微镜观察1.25μg/ml姜黄素处理HL<,60>/ADR细胞24h的形态学变化;③Annexin V-FITC/PI双染观察不同浓度姜黄素(0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5.0μg/ml、10.0μg/ml)作用24h后HL<,60>/ADR细胞的凋亡情况;④流式细胞仪检测2.5μg/ml、5.0μg/ml姜黄素作用24h后HL<,60>/ADR细胞bcl-2蛋白表达水平;⑤用不同浓度阿霉素分别处理HL<,60>细胞、HL<,60>/ADR细胞72h,MTT法检测抑制效应,并求出耐药倍数;0.2μg/ml、0.4μg/ml姜黄素预先处理细胞24h,MTT法检测不同浓度阿霉素对HL<,60>/ADR细胞的抑制效应,求出逆转倍数;⑥0.2μg/ml、0.4μg/ml姜黄素预先处理HL<,60>/ADR细胞24h,不同浓度阿霉素作用24h,流式细胞仪检测细胞内阿霉素浓度.结论:姜黄素可抑制白血病耐药细胞HL<,60>/ADR的生长,与阿霉素之间无交叉耐药;姜黄素能部分逆转HL<,60>/ADR细胞的多药耐药.
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