聚合酶链反应联合直接基因测序快速诊断感染性眼内炎的研究

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目的] 感染性眼内炎是一种严重的眼科疾病,多由眼球穿通伤或内眼手术引起,会对患者的眼球造成毁灭性的损害。患者的预后除了与致病微生物的毒力及眼外伤的程度有关外,影响患者预后的重要因素是治疗的及时性和有效性。对病情进展快眼内炎症重的患者及时进行玻璃体切除术辅以玻璃体腔内或全身药物治疗目前被认为是治疗眼内炎最可靠有效的方法。及时有效的抗菌素治疗是提高治愈率,挽救有效视力的重要手段,而病原菌检查又是明确诊断、合理用药的依据。近年来,随着耐药菌株的不断增加,给及时药物治疗带来一定的困难。本研究的目的在于探讨利用聚合酶链反应联合直接基因测序技术检测感染性眼内炎的可行性、有效性。为感染性眼内炎患者的快速诊断寻求一种新的检测方式。 方法 2005.10.-2006.10.于我院手术治疗的感染性眼内炎病例PCR联合直接基因测序技术结果对2005年10月~2006年10月同仁医院眼科中心住院手术治疗的感染性眼内炎患者47例47眼,通过手术取房水或混浊玻璃体液送聚合酶链反应联合直接基因测序检查。术后给予抗生素、抗真菌药物或激素辅助治疗。随诊3~6个月平均4.6个月。观察病原体检出情况、检出病原体种类术。同时对这些病例手术采集标本进行细菌涂片、细菌培养、真菌培养、厌氧菌培养检查。将同组病例进行的传统病原微生物检查结果作为对照组。 结果 1.感染性眼内炎手术取材47例,传统病原学检查(细菌培养检查时间为96小时:真菌培养检查时间为72小时);PCR联合基因诊断方法检查时间仅需8-10小时。 2.47例标本传统病原菌涂片检出阳性12例,病原体培养阳性17例,PCR检测阳性25例。 3.PCR检测阳性25例中经直接基因测序出病原体类型19例,病原体培养阳性17例全部检出病原体类型。与作为黄金标准的病原体培养相比,敏感性=0.9167;特异性=0.7714,Kappa=0.577,对临床诊断有较高的应用价值。。 结论 感染性眼内炎是严重的眼科感染性疾病,诊断与治疗中强调治疗时机的重要性。相对于传统病原学检查受检出率低、检出时间长的限制,聚合酶链反应联合直接基因测序技术的检出迅速,检出阳性率高。可以提前感染性眼内炎的有效抗生素的用药时间,提高抗生素治疗效果,提高了眼内炎患者的预后。因此对于感染性眼内炎,聚合酶链反应联合直接基因测序技术是一种快速、可行、有效的临床检查技术。
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