【摘 要】
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本文建立一种改进的圆盘电泳方法提取人体液中低分子量蛋白质的,去除了分子量大于30kD的高丰度高分子量蛋白质,并结合HPLC/MS/MS鉴定了提取的低分子量蛋白质。利用改进的圆盘
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本文建立一种改进的圆盘电泳方法提取人体液中低分子量蛋白质的,去除了分子量大于30kD的高丰度高分子量蛋白质,并结合HPLC/MS/MS鉴定了提取的低分子量蛋白质。利用改进的圆盘电泳方法提取血清中的低分子量蛋白质,去除了血清中象白蛋白、免疫球蛋白质等高丰度、高分子量蛋白质,并通过胶内洗脱时间、有机溶剂选择、沉淀时间、回收率试验、重复性试验、电泳分析、MALDI-TOF-MS分析证明了这种方法的可行性。用建立的圆盘电泳方法,提取血清中的低分子量蛋白质,结合热变性、溶液内酶解以及nano-HPLC/MS/MS,通过mascot检索鉴定了提取的低分子量蛋白质。利用改进的圆盘电泳法提取一份癌症病人胸腔积液中的低分子量蛋白质,通过热变性、溶液内酶解以及nano-HPLC/MS/MS,鉴定了提取的低分子量蛋白质,发现了几个可能与疾病相关的蛋白质。探讨非还原圆盘电泳在提取血清中低分子量蛋白质的特点,以及变径圆盘电泳潜在提取血清低分子量蛋白质的潜在优势。
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