鱿鱼皮胶原蛋白医用止血材料的研究

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胶原蛋白是一类重要的纤维蛋白家族,普遍存在于动物体中,是主要的细胞外膜蛋白,约占总蛋白的25%~30%。胶原蛋白是结缔组织的重要组成部分,几乎存在于所有器官的间质组织中,有助于组织、器官的稳定和维持其结构的完整。由于其独特的生化功能,胶原蛋白被应用于多个工业生产领域,如生物医药、医用材料、食品、化妆美容等。通常胶原蛋白是从哺乳动物、牛、猪等的皮和骨等原材料中提取。然而,在疯牛病和口蹄疫爆发后,人们对从水生环境中寻找提取胶原的替代原料产生了极大的兴趣,也因此海洋胶原蛋白替代哺乳动物胶原蛋白被应用具有重要意义。本文从渔业生产废料—鱿鱼皮中提取胶原并研究经化学方法和物理方法改性的鱿鱼皮胶原海绵的止血效果,主要包括以下几点内容:(1)从新鲜鱿鱼皮中提取得到酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),采用紫外全波长扫描、红外光谱检测、SDS-PAGE凝胶电泳和氨基酸组成来对其进行鉴定。结果表明制备的鱿鱼皮胶原蛋白PSC和ASC最大吸收波长均约为220nm,SDS-PAGE凝胶电泳、氨基酸组成分析、红外光谱分析显示其为典型的I型胶原蛋白。(2)将提取的胶原蛋白冷冻干燥制备胶原海绵,分别采用EDC交联、干热交联(DHT)、EDC/DHT结合交联这3种方法对其进行改性处理。通过测定其吸水性、交联度、酶解性能等来评价其作为止血海绵的可行性,并利用电镜扫描(SEM)观察其形态。结果表明制备的鱿鱼皮胶原海绵电镜扫描均为多孔网状。改性后的胶原海绵具有一定的吸液性,且不同的交联方法对其吸液性的影响也不同。3种交联方法均使胶原分子发生了交联且保留了胶原的三螺旋结构,提高了抗酶解能力,改善了胶原海绵的理化特性和机械性能,其中DHT法交联度最低,不到10%;而EDC和EDC/DHT法交联效果较好,交联度能够达到34~52%不等,明显优于DHT法。(3)采用兔耳创伤止血和肝脏止血试验来评价改性后胶原海绵的止血性能。动物止血实验结果表明ASC-E、PSC-E、ASC-E/D和PSC-E/D等4种改性鱿鱼皮胶原海绵组均能对创面起到一定止血作用,有效的缩短出血时间,减少出血量,达到快速止血的效果,其中PSC-E止血效果最佳。
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