<'15>N标记法测定山羊瘤胃细菌与原虫之间含氮物质周转规律的研究

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本研究以4头安装永久瘤胃瘘管的徐淮山羊为试验动物,采用体外发酵试验研究不同精粗比培养底物对瘤胃细菌与原虫之间含氮物质微循环的影响规律。试验设置精(玉米-豆粕):粗(羊草)分别为A (1:9);B (3:7);C (5:5);D (7:3)的四种比例日粮,研究不同精粗比日粮条件下,瘤胃发酵特性、原虫种群变化以及瘤胃原虫对细菌的吞噬率和吞噬量的影响。研究表明: 1.随着底物中精料比例的增加,细菌产量有增高趋势,B组细菌产量为四组中最低,D组显著高于A组,极显著高于B组,D组与C组差异不显著;细菌含氮量以C组最高,为5.25%,随培养时间的延长,各组变化趋势较为接近;细菌15N丰度在6.65~7.73 atom%之间,B、C两组与A、D组间差异均不显著(p>0.05),C组细菌15N富集量最高,达到367.13μg/30ml,而B组富集量最小,仅为257.13μg/30ml,且各组均在标记到4.5h时出现峰值;随底物中精料比例的增加瘤胃细菌对(NH4)2SO4的利用率也有所提高,C组利用率达16.79%,为四组中最高;细菌标记率在1.5h时达到一个较大值,均在64%~73%之间,之后随标记时间的延长有下降的趋势,所以最佳标记时间为1.5h。2.不同精粗比底物显著影响瘤胃内原虫的吞噬量及MCP的微循环,A、B、C、D四组吞噬量分别为:18.11×105 pgN/(ml h)、21.16×105 pgN/(ml h)、20.95×105 pgN/(ml h)、30.34×105 pgN/(ml h),分析后得出原虫对细菌N的吞噬速率分别为:25.27 pgN/(cell h)、29.69 pgN/(cell h)、23.17 pgN/(cell h)、35.11 pgN/(cell h)。每天每头山羊由于原虫的吞噬造成的细菌N的循环量分别估算为:173.88 mgN/(d头)、203.11 mgN/(d头)、201.14 mgN/(d头)、291.25 mgN/(d头),折算成菌体蛋白循环量分别为:1.09 gPr/(d头)、1.27 gPr/(d头)、1.26 gPr/(d头)、1.82 gPr/(d头),其中以C组循环率最大(2.79%),D组蛋白循环量最高,而B组循环率最低(1.94%),且蛋白周转量仅为D组的69.78%,可有效减少菌体蛋白循环量。3.不同精粗比底物引起了瘤胃微生态环境的改变。pH值的范围在6.01~6.73之间,呈现出随精料比例的升高而降低的趋势;各组氨氮浓度均在培养后2h达到峰值,之后又有所下降,D组氨氮浓度显著低于A组,其他组间差异均不显著;乙酸浓度和乙酸/丙酸的比值均随精料比例的升高而降低,而丙酸和丁酸的浓度则随精料比例的升高而上升,且A、B、C、D四组TVFA摩尔浓度均随培养时间的延长而增高;日粮精粗比显著影响徐淮山羊瘤胃微生物的细胞密度,原虫密度以C组(5:5)最高,为7.33×104cell/ml;各组中内毛虫、双毛虫、等毛虫和头毛虫的总数均占到原虫总数的90%以上,且内毛虫与等毛虫的数量有随精料比例的提高而升高的趋势,双毛虫和头毛虫则恰恰相反,随精料比例的上升,其数量呈下降趋势。
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