CXCR1及其相关蛋白与胃癌临床病理特征的关系和差异蛋白HSP27的功能验证

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目的:研究CXCR1及其相关蛋白与胃癌临床病理特征的关系和HSP27对胃癌的侵袭迁移和凋亡的影响。方法:1.采用免疫组化的方法检测CXCR1、HSP27、HNRNPK、NM23、 KERATIN8、SORCIN在胃癌和癌旁的表达,统计分析各因子的表达情况以及与性别、年龄、分期和是否有淋巴结转移的关系,并进一步分析CXCR1与各因子的相关性。2.构建四个针对HSP27的短发夹真核表达载体,将其导入人源性胃癌细胞MKN45,采用western blotting和real-time-PCR方法筛选出对HSP27基因抑制最强的载体(si-HSP27-MKN45)。将细胞分成三组,空白组(CON),对照组(NC)其中NC为转染了荧光无关序列的siRNA和si-HSP27-MKN45。用划痕实验,Transwell实验和流式细胞术检测细胞的迁移,侵袭和凋亡。用western blotting方法检测三组细胞的CXCR1的表达。结果:CXCR1、HSP27、HNRNPK、NM23、KERATIN8、SORCIN/、种蛋白阳性表达在胃癌和癌旁细胞膜或细胞质,但表达强度弱程度不一。CXCR1、HSP27、NM23、KERATIN8、SORCIN在癌的表达强于癌旁组织,差异具有显著性(P<0.05);而HNRNPK在癌和癌旁的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。各个指标的表达程度在性别和年龄方面都不具有统计学意义(P>0.05)。SORCIN、SP27、HNRNP、 CXCR1在有淋巴结转移的患者中表达高于无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05),KERATIN8、NM23在有淋巴结转移的患者中表达低于无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析得出SORCIN、HSP27、HNRNP、CXCR1与胃癌分期成正相关(P<0.05),NM23、KERATIN8与胃癌分期不具有相关性(P>0.05)。分析CXCR1与HSP27、SORCIN、HNRNPK、KERATIN8、NM23的相关性,结果表示CXCR1与HSP27、SORCIN、 HNRNPK、NM23、KERATIN8的表达成正相关性(P>0.05)。与CON组和NC组相比si-HSP27-MKN45的HSP27的表达量明显降低(P<0.05),细胞的迁移,侵袭减弱(P<0.05)细胞的凋亡减少。且si-HSP27-MKN45的CXCR1表达降低(P<0.05)。结论:1.这六个因子除HNRNPK外在癌的表达强于癌旁,且都与性别年龄无关。SORCIN、HSP27、HNRNP、CXCR1在有淋巴结转移的患者中表达高于无淋巴结转移患者,KERATIN8、NM23在有淋巴结转移的患者中表达低于无淋巴结转移患者。SORCIN、HSP27、 HNRNPK、CXCR1与胃癌分期成正相关,NM23、KERATIN8与胃癌分期不相关。CXCR1与HSP27、SORCIN、HNRNPK、NM23、 KERATIN8的表达成正相关性(P>0.05)。2.HSP27可增强胃癌细胞的侵袭迁移和抗凋亡能力。
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