和平散的肠动力作用及其对佐剂性关节炎大鼠肠动力的影响

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目的:类风湿关节炎的肠动力障碍是风湿病临床的常见问题之一。本课题拟对和平散的肠动力作用及其佐剂性关节炎大鼠(AA)肠动力障碍的防治效应进行研究,为其进一步临床应用提供实验依据。 方法: 1.正常大鼠肠管收缩功能的测定取Wistar大鼠,随机分为6组,每组8只,空白对照组、和平散0.05ml组、0.1ml组、0.15ml组、0.2ml组,胃复安组。实验前将大鼠禁食12h,开腹,取2cm肠管,克氏液冲洗,上下端用线结扎,一端固定在连续供氧(95%O2,5%CO2)的麦氏管上,置于内盛40ml,37℃Kreb-Henseleit(K-H)液浴管中,另一端固定于拉力换能器,肠管于克氏液中稳定30min,待肠管收缩平稳后记录正常曲线,分别向浴管内加入蒸馏水0.1ml、和平散0.05ml、0.10ml、0.15ml、0.2ml、胃复安10-5×0.1ml干预,5min后,记录肠管收缩曲线3min。然后用克氏液冲洗肠管3次,稳定30min,使其恢复正常曲线后,重复加药,每个药物重复5次。记录振幅(mm),进行最后统计。 2.正常小鼠小肠推进速度及血浆胃动素(MTL)、一氧化氮(NO)和肠管血管活性肠肽(VIP)检测。将昆明小鼠随机分为5组,每组8只,和平散大剂量组16g/kg·d,和平散中剂量组8g/kg·d,和平散小剂量组4g/kg·d,胃复安组6mg/kg·d,空白对照组灌服蒸馏水0.2ml/d,以上各组均每日灌服一次,共6天。于第6天实验前禁食12小时。末次给药1小时后灌服碳末悬浊液,20分钟后经眼眶采血,离心,取血浆,放射免疫法测量血浆中胃动素含量,硝酸还原酶法测NO含量。采血后,立即脱颈处死,开腹,取出整个肠道,测量幽门至碳末推进长度,其占幽门至回盲部全长的百分率为小肠推进速度。取回盲部上段肠管2cm,克氏液冲洗3次,放置4%多聚甲醛固定,蜡块包埋,染色,免疫组织化学染色法检测VIP的表达。 3.佐剂性关节炎大鼠小肠推进速度及血浆MTL、TNF-α、超氧化物歧化酶(SOD)和肠管VIP检测Wistar大鼠应用完全弗氏佐剂建立AA大鼠模型,造模后第19天,将出现二次反应的大鼠随机分成模型组、雷公藤多甙片组、雷公藤多甙片+和平散组、和平散组,每组8只,另随机取8只正常Wistar大鼠为空白对照组,连续灌胃给药14天。第14天实验前禁食12h,末次给药后1小时灌炭末悬浊液,20分钟后,经腹主动脉取血,放射免疫分析法测量大鼠血浆中MTL、TNF-α含量,黄嘌呤氧化酶法测SOD含量。取血后,迅速取出整个肠道,铺直后测幽门至炭末前沿的距离,其占幽门至回盲肠部全长的百分率为小肠推进速度。取回盲部上段肠管2cm,克氏液冲洗3次,放置4%多聚甲醛固定,蜡块包埋,染色,免疫组化法检测VIP的表达情况。 结论: 1.离体和在体实验证实和平散具有促肠动力作用并能明显升高正常小鼠血浆MTL水平、降低NO含量、抑制肠管VIP表达。 2.AA大鼠小肠推进速度明显减慢,MTL水平显著降低,提示AA大鼠存在明显肠动力障碍。 3.和平散对AA大鼠肠动力障碍具有防治作用,其作用机制可能与其升高血浆MTL水平、抑制肠管VIP表达抗氧化等有关。
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