吉西他滨耐药的胰腺癌细胞株的建立及相关特性检测

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背景:胰腺癌是人类预后最差的恶性肿瘤之一,2013年在美国列癌症相关死亡的第四大病因,其5年生存率不足5%。大部分患者初诊时已错过手术切除机会,且对放疗敏感性低,对化疗药物易产生耐药性。吉西他滨(gemcitabine,GEM),胰腺癌临床一线治疗用药,相对于传统化疗药物5-氟尿嘧啶,其不仅提高了胰腺癌患者中位总生存期,而且大大改善了患者的生活质量。但随着临床上吉西他滨耐药性的出现,使得其药效的发挥大打折扣。因此,构建耐GEM的胰腺癌细胞并研究耐药机制是当前胰腺癌防治最迫切的研究课题。目的:探讨以人胰腺癌SW1990细胞为研究对象,构建对GEM耐药的胰腺癌细胞株方法,并对耐药细胞与亲本细胞的一些特性进行检测与比较。方法1.采用逐步浓度递增法诱导对吉西他滨耐药的细胞株SW1990-GZ。2.采取MTT法,检测SW1990和SW1990-GZ的IC50、耐药系数,并观察其生长差异性。3.采用高效液相色谱法(HPLC)检测不同时间点SW1990和SW1990-GZ对吉西他滨药物的摄取情况。结果1.SW1990和SW1990-GZ的IC50分别为(0.07±0.0021)μg/m L、(87.5±3.24)μg/m L,耐药系数R为1250;在不同浓度吉西他滨作用下,诱导后耐药的SW1990-GZ对吉西他滨的敏感性明显降低。2.细胞生长曲线显示耐药细胞SW1990-GZ相对于SW1990生长缓慢。3.不同时间点吉西他滨孵育后,SW1990-GZ细胞对吉西他滨药物的摄取比SW1990细胞减低。结论1.成功诱导了耐吉西他滨药物的SW1990-GZ细胞株。SW1990-GZ细胞株的耐药性能稳定,明显。2.SW1990-GZ细胞株生长显著减慢。3.SW1990-GZ细胞可能存在着一定的机制使得细胞摄取吉西他滨降低。
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