D-泛酸又名维生素B5,是人体和动物必需的一种营养物质,广泛应用于食品、饲料、医药等领域,合成D-泛酸的关键在于合成其前体物质D-泛解酸内酯。本研究利用实验室筛选得到的一株具有D-泛解酸内酯水解酶活力的腐皮镰孢霉菌,选择性水解DL-泛解酸内酯来实现DL-泛解酸内酯的拆分,获得D-泛解酸内酯。论文拟通过对原始菌株的诱变筛选,以获得高活性D-泛解酸内酯水解酶突变株,提高生产效率;以及在突变株的基础上进行固定化细胞研究,以提高酶的稳定性和重复利用性,降低生产成本,具体研究结果如下:以本实验室筛选得到的一株具有D-泛解酸内酯水解酶活力的腐皮镰孢霉菌Fusarium solani（酶活为1420 U/L）为出发菌株,先后利用常温室压等离子和紫外-氯化锂技术,对其进行了四轮递进诱变选育,最终筛选得到一株酶活达3460 U/L的菌株4-80-6,酶活较出发菌株提高了143.66%,并且通过八代传代培养,该菌株遗传性较为稳定。通过对突变株4-80-6与原始菌株的最适温度、p H、底物浓度比较,结果表明突变株4-80-6没有改变D-泛解酸内酯水解酶酶学性质。以20%的底物浓度催化反应时,突变株4-80-6水解率由原始菌11.6%提高到17.1%,反应液旋光度由原始菌的1.216提高到了2.785,说明该突变株在没有改变其立体选择性的前提下对DL-泛解酸内酯的水解能力有所提高。通过对突变株4-80-6菌株进行发酵条件优化,得到最佳产酶条件为:培养温度25℃,培养基初始p H 8.5,接种量10.5%,培养时间48 h,该条件下酶活为4330 U/L,比优化前提高了25.14%。琼脂包埋法固定化细胞具有机械强度高,酶活损失较小的优点,可以重复利用33次以上,平均固定化回收率为82.35%。经优化琼脂浓度为1.5%,包埋率为15%,固定化温度50℃,4℃下冷却凝固12 h,然后切块形状大小为0.8 cm*0.8cm*0.8 cm时固定化回收率最高。固定化细胞催化的最佳条件为:温度30℃,p H为7.5,固定化细胞添加量为每100 m L 30%DL-泛解酸内酯底物溶液添加80 g固定化细胞,按照上述最佳条件催化,固定化细胞催化反应14 h水解率最高可达38.32%,可以达到游离细胞93.62%的水解能力,固定化细胞催化后的产物光学纯度为98%。综上,本研究通过原始菌株的诱变筛选及对突变株发酵条件的优化,使D-泛解酸内酯水解酶酶活较原始菌株提高了204.92%,提高了催化效率,为工业上催化拆分DL-泛解酸内酯提供了更好的酶源;通过固定化细胞研究,提高了酶的稳定性和重复利用性,降低了生产成本,提高了该菌株的工业应用价值。