真核生物延伸因子2激酶(eukaryotic elongation factor 2 kinase,eEF2K)是由人类基因组eEF2K基因编码的一个激酶,是一个高度保守的激酶,与典型的蛋白激酶在序列上同源性小,它归属于一个名叫"α-激酶"的非典型蛋白激酶小家族。研究显示,eEF2K在一定的代谢压力条件下能磷酸化并抑制真核生物延伸因子2(eukaryotic elongation factor 2,eEF2)的功能,进而抑制细胞中蛋白质合成过程中多肽链的延伸,使细胞中能量和氨基酸的消耗减少,帮助细胞度过营养缺乏等不利条件。在很多癌细胞中eEF2K都有很高的活性。同时eEF2K的活性依赖于钙离子和钙调蛋白,它还有细胞的保护作用使之成为癌症等疾病药物治疗的潜在靶点。本文旨在运用高通量药物筛选的方法来发现eEF2K的小分子抑制剂及其药用前景。在文中我们建立并优化了一个靶向eEF2K小分子抑制剂的高通量筛选方法。我们选用DMSO作为阴性对照,化合物A484954作为阳性对照,检测最终反应体系中的冷光值来反应化合物抑制率。如果化合物能抑制反应体系中eEF2K的活性,则与阳性对照化合物反应孔的冷光值相比,其最终检测到的冷光值会降低。由此计算我们筛选过程中化合物的抑制率。最终我们对56000个小分子化合物进行了大规模的随机筛选,得到了9个具有剂量依赖性反应的活性化合物,选出了5个IC50值小于50μM的化合物进行了体外细胞水平的功能性验证,进一步的研究正在进行中。我们的该项研究发现为靶向eEF2K的癌症等疾病的药物治疗奠定了良好的基础。