以减毒沙门氏菌携带HPV18-L1真核表达质粒预防子宫颈癌的研究

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宫颈癌是世界上第二大女性高发恶性肿瘤。目前,85%的宫颈癌发生在发展中国家。在发展中国家,13%的女性肿瘤患者为宫颈癌患者,且这一发生率在逐年上升、发病年龄亦趋于年轻化。在发达国家由于有效的宫颈癌筛查手段及预防性疫苗的上市应用,使得宫颈癌的发生率明显下降。但在发展中国家,由于经济水平低,极大的限制了宫颈癌筛查及预防措施的普及应用。如何研制出价廉高效,操作简便的宫颈癌预防性疫苗,成为发展中国家亟待解决的问题。大量的流行病学资料显示,HPV16/18是导致宫颈癌的主要类型,约占总数的70%。有统计显示,HPV16主要导致宫颈鳞状细胞癌,HPV18主要导致宫颈腺癌。研究发现,宫颈腺癌恶性程度高于宫颈鳞癌,易早期转移、对放、化疗均不敏感,预后差,且发病率有逐年增高趋势,所以对HPV18型感染早期预防尤为重要。减毒沙门氏菌作为DNA疫苗运载体可运送多种病原体抗原,且有望通过单次免疫剂量、粘膜途径免疫等简便方式诱导细胞免疫和体液免疫反应;其安全性亦得到近30年的验证。因此,减毒沙门氏菌可作为运载体携带目的抗原预防HPV感染,进而达到预防宫颈癌的目的。本研究从长春地区妇女宫颈癌组织基因组DNA中成功钓取出HPV18-L1基因序列,构建了pVax1-HPV18-L1真核表达质粒,转染地鼠肾BHK细胞后进行免疫细胞化学染色分析,证明该质粒可成功表达HPV18-L1蛋白,并与特异抗体发生抗原抗体反应。进而,以减毒沙门氏菌Ty21a作为运载体,携带pVax1-HPV18-L1质粒通过滴鼻方式免疫小鼠,成功于小鼠血清中诱导出特异性抗体。本实验为研制价廉高效、操作简便的预防性HPV减毒活疫苗提供了实验基础。
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