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脊椎动物中,卵子中储存的母源因子调控受精、早期细胞分裂、胚层的形成及轴线确立等早期胚胎发育的各个过程。囊胚阶段开始表达的Nodal信号是诱导中胚层和内胚层细胞命运的关键信号。在斑马鱼中有两个nodal基因,即ndr1和ndr2,其合子基因表达发生在中囊胚期之后,起着诱导中内胚层细胞命运的作用,但目前不清楚其在胚盘腹侧区的表达是否受母源转录因子的调控。本研究主要探讨了母源T-box转录因子EomesoderminA(Eomesa)在调控斑马鱼胚胎中nodal基因表达及中内胚层诱导方面的作用及其机制。本研究首先利用卵母细胞中敲降基因表达的方法,发现敲降母源eomesa后,晚囊胚和早期原肠胚中一些中胚层和内胚层基因的表达出现缺失,在缺失母源eomesa的突变体胚胎中也出现同样的缺陷,表明母源Eomesa在中内胚层诱导中发挥了作用。进一步的研究发现,缺失母源eomesa的胚胎中,nodal基因ndr1与ndr2在30%外包期或之前均不能在胚盘腹侧部边缘表达,说明母源Eomesa对于及时启动nodal基因在这些区域的表达是必需的。转基因及生化分析表明,Eomesa可以结合到ndr1启动子或ndr2第一内含子中含Eomes结合位点的DNA序列上,从而直接调控二者的转录。Mxtx2是在中囊胚时期开始表达的转录因子,可调控nodal基因的表达。母源敲低eomesa的胚胎或缺失eomesa的突变体胚胎中,mxtx2的表达直到囊胚期结束时才开始在胚盘背部表达,但仍不能在腹侧区表达,说明母源Eomesa对于激活mxtx2的适时表达也是必需的。通过对mxtx2的启动子进行分析,发现Eomesa可以直接结合mxtx2启动子上的Eomes结合位点,从而激活mxtx2的表达。互作分析表明,母源Eomesa主要通过与其下游的Mxtx2协同作用,共同促进nodal基因的表达。综上所述,本研究第一次在斑马鱼中发现了诱导nodal基因在囊胚腹侧部及时表达的母源转录因子。同时揭示,脊椎动物中,母源T-box转录因子在调控nodal基因表达的功能上具有保守性。