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对采集得到的65个科95种植物共计132种提取物(包括枝,叶,果和全株)进行了抑菌和杀线虫活性初步筛选,对筛选获得的活性植物白花除虫菊(Pyrethrumcinerariifolium)和蒙自蕈树(Altingiayunnunensis)内生微生物进行分离并筛选抑菌活性菌株,对无花果(Ficuscarica)内生微生物进行分离并筛选杀线虫活性菌株,在前期筛选的基础上,选取植物无花果(F.carica)和蒙自蕈树(A.yunnunensis)以及内生真菌MFF-2和PLF-19的进行了活性成分的分离和鉴定,取得以下结果:
1.对95种植物的不同部位进行抑菌活性筛选,获得有活性的植物26种,其中,川八角莲(Dysosmaveitchii),蒙自蕈树(A.yunnunensis)等13种植物为首次发现具抑菌活性。对这95种植物进行杀线虫活性筛选,获得有活性的植物13种,其中,无花果(F.carica)和云南山枇花(Gordonhzchrysandra)等11种植物为首次发现具有杀线虫活性。根据筛选结果,选择蒙自蕈树(A.yunnunensis)和无花果(F.carica)作为进一步研究对象。
2.从白花除虫菊(P.cinerariifolium)中分离到内生微生物233株,其中37株菌对蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)有抑菌活性;有36株菌对枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)有抑菌活性;有14株菌对淡紫拟青霉菌(Paecilomyceslilacinus)有抑菌活性;有28株菌对大肠杆菌(Escherichiacoli)有抑菌活性。从蒙自蕈树(A.yunnunensis)中分离到内生微生物125株,其中,有26株菌对蜡样芽孢杆菌(B.cereus)有抑菌活性;有26株菌对枯草芽孢杆菌(B.subtilis)有抑菌活性;有9株菌对淡紫拟青霉菌(P.lilacinus)有抑菌活性;有16株菌对大肠杆菌(E.coli)有抑菌活性。从无花果(F.carica)中分离得到的258株内生微生物中,72h内对松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)致死率达到80%以上的内生真菌只有PLF-19一株。
3.从蒙自蕈树(A.yunnunensis)叶的提取物中分离得到化合物Cholesterylacetate(M1),methylshikimate(M2)和3,4-Epoxy-5-hydroxy-1-cyclohexenecarboxylicacid(M3)。活性测定表明:当浓度为400μg/disc时,化合物M2(methylshikimate)对金黄色葡萄球菌(S.aureus)和蜡样芽孢杆菌(B.cereus)表现出抑菌活性,抑菌圈分别为1.4cm和1.2cm。化合物M3(3,4-Epoxy-5-hydroxy-1-cyclohexenecarboxylicacid)对金黄色葡萄球菌(S.aureus)和蜡样芽孢杆菌(B.cereus)表现出抑菌活性,抑菌圈分别为1.0cm和0.9cm。从无花果(F.carica)叶的提取物中分离得到活性化合物psoralen(W1),活性测定表明:72h时,化合物W1对全齿复活线虫(P.redivivus),秀丽隐杆线虫(C.elegans)和松材线虫(B.xylophilus)的致死中浓度(LC50)分别为177.8mgL-1,110.1mgL-1和249.1mgL-1。
4.从内生真菌MFF-2的发酵液的提取物中分离得到活性化合物MFF1和MFF2经鉴定其结构为deacetylisowortmin和(E)-2-(hydroxymethyl)-3-(2-hydroxypent-3-enyl)phenol。化合物MFF1和MFF2为新化合物。活性测定表明:化合物MFF1对病原真菌淡紫拟青霉(P.lilacinus)有抗菌活性,在500μg/disc时其抑菌圈直径是0.8cm,化合物MFF2对病原真菌淡紫拟青霉(P.lilacinus)没有有抗菌活性,在800μg/disc时,该化合物对金黄色葡萄球菌(S.aureus)有抑菌活性,其抑菌圈直径是0.9cm。从内生真菌PLF-19的发酵液的提取物中分离得到活性化合物(Z)-4-oxo-5-(5-oxopyrrolidin-2-ylidene)pentanoieacid(PLF1)和Erythrodiol(PLF5)。化合物PLF1为新化合物。活性测定表明:在浓度1000mgL-1时PLF1和PLF5对全齿复活线虫(P.redivivus)和秀丽隐杆线虫(C.elegans)表现出一定的毒杀活性。