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本文对乌药生物碱提取物的制备工艺进行了优化研究,确定了其制备工艺;对乌药生物碱提取物的化学成分进行了分离,经理化、光谱及波谱数据鉴定了13个化合物,包括12个异喹啉生物碱,1个倍半萜类化合物,其中4个生物碱在乌药植物中为首次发现;对乌药生物碱提取物定性及定量研究的基础上,建立了乌药生物碱提取物的质量标准,并制定了乌药生物碱提取物的标准草案。 乌药生物碱提取物的制备工艺研究方面:以提取物中的去甲异波尔定(norisoboldine)为指标,采用正交设计优化了乌药生物碱提取物的制备工艺,确定制备工艺为:取乌药块根饮片,加入10倍量的55%乙醇,回流提取3次,每次提取时间2小时,合并乙醇提取液,醇提取液浓缩后挥至无醇味,采用药材等倍量的2%盐酸进行酸溶处理,酸溶液用氢氧化钠溶液调pH值至9.0时进行碱沉,静胃24小时后离心并减压干燥即得。制得的8批乌药生物碱提取物的得膏率和去甲异波尔定(norisoboldine)含量较为稳定,该工艺方法重现性好。 乌药生物碱提取物的化学成分研究方面:本文运用多种多种现代色谱分离技术,对乌药生物碱提取物的化学成分进行分离研究,共计分离得到20个化合物,经理化、光谱及波谱数据鉴定了其中13个化合物,包括12个异喹啉生物碱,1个倍半萜类化合物。其中4个生物碱在乌药植物中为首次发现,分别为防线瑞香宁碱((actinodaphnine),WY-13),norjuziphine(WY-14),次波尔定((secoboldine),WY-32),次新木姜子碱((secolaurolitsine),F-5)。其余8个生物碱化合物分别为去甲异波尔定((norisoboldine),WY-1),钓樟卡品((Lindcarpine),WY-2),波尔定((boldine),WY-3),linderaline(WY-4),异波尔定((isoboldine),WY-5),牛心果碱((reticuline),WY-8),N-甲基六驳碱((N-methyllaurotetanine),WY-10),苍自((pallidine),WY-15),1个倍半萜类化合物为乌药醚内酯((linderane),F-8)。 乌药生物碱提取物的质量标准研究方面:本文对乌药生物碱提取物进行了定量及定性分析。在中国典测定乌药药材中去甲异波尔定含量的方法基础上,对乌药生物碱提取物中的去异波尔定的含量进行了测定,结果乌药生物碱提取物中去甲异波尔定含量均高于40%;通过对酸性染料比色法的染料种类、酸性缓冲液的pH值、氯仿用量等因素的考察,首次建立了采用酸性染料比色法测定乌药生物碱提取物种的总碱含量,含量测定结果为提取物中总碱含量均高于50%。定性分析方面,首次建立了以去甲异波尔定(norisoboldine)和波尔定(boldine)为指标成分的乌药生物碱提取物薄层色谱分析,该法专属性较强;同时照中国药典标准要求对8批乌药生物碱提取物进行了水分、炽灼残渣和重金属等检查项考察,起草了乌药生物碱提取物质量标准草案。 综上所述,本文研究的乌药生物碱提取物制备工艺方法可行性和重现性均较好,适合乌药生物碱提取物的放大生产。所建的质量标准科学、可行,可用于乌药生物碱提取物的质量控制。