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猪流行性乙型脑炎(Epidemic encephalitis B)简称猪乙脑,是由乙型脑炎病毒引起的一种蚊媒性人兽共患传染病。猪群对乙型脑炎的感染非常普遍,也是乙型脑炎病毒的重要贮存宿主与增殖宿主,是乙型脑炎的主要传染源。怀孕母猪主要表现为高热、流产、死胎、木乃伊胎,公猪表现为睾丸炎甚至不育,可给养猪业的发展造成了严重经济损失。本研究是对四川分离的乙型脑炎病毒株进行克隆纯化和生物学特性和免疫学特性研究,以筛选出一株免疫原性好的候备制苗株。1.乙型脑炎病毒的克隆纯化对乙型脑炎病毒株进行细胞培养、挑斑纯化,得到具有稳定蚀斑性状的两个病毒株,分别为CZ-1和NJ1-1.CZ1-1株于72h形成2-3mm蚀斑,NJ1-1株于48h形成1-2mm的蚀斑,经RT-PCR鉴定,扩增出JEV的高保守区PrM/E基因。各毒株对BHK-21的细胞的适应性好,致病变能力强且稳定,细胞毒价(TCID50) CZ1-1为10-6.52/O.1mL,NJ1-1为10-6.90/0.1mL。各毒株对小鼠的适应性良好,致病力较强,小鼠毒价(LD50)CZ1-1为10-8.55/0.03mL,NJ1-1为10-7.56/0.03mL。2.乙型脑炎疫苗的免疫原性研究用CZ1-1和NJ1-1毒株分别制备灭活疫苗,病毒含量为7.01gLD50,并对其进行物理性状检验、无菌检验、灭活检验、安全检验及效力检验。结果表明该疫苗无菌、安全。对小鼠腹腔免疫两次,间隔7d。一免后14d用两病毒株对免疫组小鼠进行脑内攻毒和腹腔攻毒,检测免疫保护力。结果分别为：CZ1-1毒株脑内攻毒后的保护率为70%、60%,NJ1-1脑内攻毒后的保护率为70%、50%,CZl-1株腹腔攻击后的保护率为80%、70%,NJ1-1腹腔攻击的保护率为100%、90%。达到或优于商品化灭活疫苗的水平。于一免后7d、14d、21d、28d采血,用微量血清中和实验检测中和抗体,在28d时CZ1-1效价为1:138,NJ1-1效价为1:96,相对而言,CZl-1可作为乙型脑炎的候备制苗毒株。