目的通过观察缺血预适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质病理组织学损伤的影响及梗死灶周边皮质区、海马CA1区低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,探讨缺血预适应的脑保护机制。方法1将130只成年雄性SD大鼠随机分为三组:假手术组(SO组,n=10)、脑缺血组(MCAO组,n=60)和脑缺血预适应组(BIP组,n=60),后两组按缺血后再灌注时间的不同分为2、6、12、24、48和72h 6个时间点。每个时间点10只大鼠,其中5只用于HE染色及免疫组化染色,余5只用于Western blot法检测。2模型制备方法如下:BIP组:采用大脑中动脉(MCA)二次线栓法,给予大鼠右侧大脑中动脉缺血10min作为缺血预适应条件,间隔24h,再次闭塞右侧大脑中动脉,造成缺血2h,而后于再灌注各时间点处死大鼠;MCAO组:以假手术替代预适应,余步骤同BIP组;SO组:以两次假手术替代预适应及再缺血,再灌注24h后处死大鼠取材。3采用HE染色法观察大鼠脑缺血再灌注后不同时间点额叶皮质区病理组织学变化,采用免疫组化法及Western blot法检测额叶梗死灶周边皮质区、缺血侧海马CA1区HIF-1α与VEGF的蛋白表达。结果1 SO组未见脑组织病理性改变,与MCAO组对比,BIP组在再灌注各时间点脑组织病理学改变轻。2 MCAO组于脑缺血再灌注2h梗死灶周边皮质区、海马CA1区HIF-1α阳性细胞表达有所增加,24h表达至各时间点最高水平,随后表达逐渐降低,72h表达仍明显高于SO组。BIP组梗死灶周边皮质区HIF-1α的阳性细胞表达在各时间点均比MCAO组多,差异有统计学意义(P<0.05);除再灌注2、6h外,BIP组海马CA1区各时间点HIF-1α阳性细胞表达较MCAO组均增多,差异有统计学意义(P<0.05)。3 MCAO组于脑缺血再灌注2h梗死灶周边皮质区、海马CA1区VEGF阳性细胞表达开始增加,随后表达递增,到24h表达至各时间点最高水平,之后开始下降,72h表达仍处于较高水平。BIP组各时间点梗死灶周边皮质区、海马CA1区VEGF阳性细胞表达数量均多于MCAO组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4 SO组HIF-1α的蛋白条带表达微弱。MCAO组梗死灶周边皮质区、海马CA1区HIF-1α蛋白表达均于再灌注2h开始增加,随后逐渐增加,至24h表达量为各时间点峰值,之后开始下降,72h表达仍高于SO组。BIP组梗死灶周边皮质区、海马CA1区各时间点HIF-1α蛋白表达量均高于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05)。5 SO组VEGF蛋白条带表达微弱。MCAO组梗死灶周边皮质区、海马CA1区VEGF蛋白表达均于再灌注2h开始增加,而后逐渐递增,至24h达各时间点表达最高水平,随后表达递减,72h表达仍维持在较高水平。BIP组梗死灶周边皮质区、海马CA1区各时间点VEGF的蛋白表达量均高于MCAO组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1缺血预适应后局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织病理学损伤减轻,有效地减轻了脑缺血再灌注损伤。2缺血预适应后局灶性脑缺血再灌注大鼠梗死灶周边皮质区、海马CA1区HIF-1α、VEGF的表达增加。3缺血预适应可能通过上调HIF-1α、VEGF的表达,诱导脑缺血耐受,发挥脑保护作用。