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目的:Bevacizumab(贝伐单抗)(商品名Avastin,Genentech公司)是一种重组人VEGF单克隆全长抗体,分子量149kDa,可以同VEGF的所有异构体发生高亲和力结合,间接阻断VEGF和其受体的结合从而抑制新生血管的形成,从而抑制了新生血管的形成以及减少血管的通透性。但生物半衰期3—5天,目前临床上需要每隔28天进行一次玻璃体腔注药,极大增加了发生并发症的概率。本实验旨在研制玻璃体内注射用贝伐单抗聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)缓释微球,并鉴定其相关性质。以期找到一种新的适用于玻璃体内注射的贝伐单抗缓释剂型,延长药物作用时间,增加眼内药物浓度,减少重复注药次数。方法:采用无水乳化法(S/O/hO)制备贝伐单抗-PLGA微球。然后称取微球20mg,用1mL二氯甲烷涡旋振荡5 min溶解,离心弃去含聚合物的上清液溶液,重复五次后然后加10mlPBS充分溶解,得贝伐单抗样品液, ELISA测定计算待测液中贝伐单抗的浓度,计算出微球中的贝伐单抗含量,得微球的载药量和包封率,扫描电镜(SEM)观测其形态及粒径。称取12.5mg的Bevacizumab—PLGA微球置于装有2.5mL PBS缓冲溶液(PH=7.2)的离心管中,置于4℃冰箱中,分别在第1/2d、1d、3d、7d、14d、28d定时移去0.01mL缓释液,并补充同样体积的缓冲液,保存于离心管中并标号冻存于-80℃冰箱待测.ELISA法测定贝伐单抗浓度,从而计算出贝伐单抗微球累积释药率。结果:采用上述无水乳化法制备的贝伐单抗-PLGA微粒大小较为均匀(粒径2～7μm)、表面光滑圆整。整个操作过程比较简单,且添加剂具有生物兼容性,对人体没有威胁。用酶联免疫测定法(ELISA)测定微球的包封率约49%,载药量约10%,该载荷贝伐单抗的微球的体外释药结果显示其体外释药过程较为稳定.第1天突释贝伐单抗达到20.1%,第3天达到34.6%,第7天达到63%,从第14天起达到87%,第28d达到90%,可以认为在14天时微球中药物已基本彻底释出,由上述结果可以证明微球有明显的缓释效果。结论:本研究证明S/O/hO法制备的贝伐单抗—PLGA微球具有较好的外观,满足玻璃体腔注药需求,初步制成可适用于玻璃体腔注射用贝伐单抗—PLGA缓释微球,这种微球有可能成为治疗相关疾病的理想手段。