13C辅助的定量代谢物组学和代谢流分析方法研究谷氨酸添加对毕赤酵母生理代谢的影响

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毕赤酵母作为外源蛋白高效表达的宿主,在制药工业中得到了广泛应用。本实验室在前期研究中发现谷氨酸添加有利于毕赤酵母高产菌株G1HL进一步提高β-半乳糖苷酶的产量,但对于产量提高的机理仍缺乏了解。本文利用~(13)C辅助的定量代谢物组学和代谢流分析方法,考察添加谷氨酸对毕赤酵母高产菌株生理代谢的影响并探索其调控机理。首先研究了谷氨酸添加对细胞宏观生理代谢的影响。结果表明,在以葡萄糖为碳源的发酵过程中添加谷氨酸,β-半乳糖苷酶的表达量提高了50%,细胞比生长速率降低了6%,表明β-半乳糖苷酶产量的提高是以
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