坏死杆菌（Fusobacterium necrophorum,Fn）是无芽孢、严格厌氧、多形态的革兰氏阴性菌,诱发多种疾病,其中以牛羊腐蹄病、肝脓肿和人的Lemierre′s综合征最为典型。坏死杆菌诱导多种细胞发生凋亡及炎症,中性粒细胞和巨噬细胞作为机体重要的防御细胞也包含在内,但其作用机制尚不明确。本文以羊中性粒细胞和巨噬细胞（RAW246.7）为研究对象,探索了坏死杆菌诱导免疫细胞凋亡和产生炎性因子的机制,为研究坏死杆菌感染机制提供基础。本实验主要包括四部分:（1）坏死杆菌对巨噬细胞增殖的影响。将坏死杆菌以MOI为0、50:1、100:1、200:1、500:1、1000:1的感染复数分别感染巨噬细胞2 h、4 h、6 h,EDU检测细胞增殖情况,结果表明坏死杆菌呈剂量和时间依赖性抑制巨噬细胞增殖,筛选出在MOI为100:1作为后续试验的处理条件。（2）坏死杆菌诱导中性粒细胞和巨噬细胞凋亡。采用Hoechst染色、DNA Ladder和流式细胞术检测坏死杆菌以MOI为0和100:1的感染复数感染绵羊外周血中性粒细胞和巨噬细胞2 h、4 h、6 h后细胞凋亡情况,Hoechst染色、DNA Ladder分析显示经坏死杆菌处理后,巨噬细胞凋亡荧光染色增强,DNA呈现“梯状”条带;流式结果表明坏死杆菌促进细胞凋亡,且在坏死杆菌处理绵羊中性粒细胞4 h细胞凋亡最显著。（3）坏死杆菌对绵羊中性粒细胞影响的转录组学分析。用坏死杆菌处理中性粒细胞4 h,用以转录组学分析。结果显示坏死杆菌通过NF-κB和线粒体信号通路诱导绵羊中性粒细胞凋亡以及炎性因子的产生。（4）坏死杆菌对凋亡和炎性基因表达的调控作用。q RT-PCR和Western Blot检测凋亡相关Bcl-2、Bax、AIF、Cytc、Caspase-3及炎性相关TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,从基因与蛋白水平证明坏死杆菌促进免疫细胞相关凋亡和炎性因子的表达。本研究证明牛坏死杆菌促进中性粒细胞和巨噬细胞凋亡,且通过调控Bcl-2、Bax、AIF、Cytc、Caspase-3及TNF-α、IL-1β、IL-6促进免疫细胞凋亡与炎性反应,为研究坏死杆菌的致病机制奠定了基础。