大鼠颞叶癫痫模型中Q808对神经元损伤的保护作用

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目的:探讨Q808对大鼠颞叶癫痫(TLE)模型神经元损伤的保护作用,为临床应用Q808治疗TLE提供实验依据。方法:选取50只6~8周龄健康雄性SD大鼠随机分为5个组(每组n=10),正常对照组大鼠不做任何处理,其余大鼠腹腔注射氯化锂(127mg/kg),予阿托品灌胃30分钟后腹腔内注射匹罗卡品(20mg/kg),建立颞叶癫痫模型。根据癫痫发作Racine 6级评分标准达Ⅳ-Ⅴ级、持续抽搐30min的大鼠做为实验组,再分为4组,TLE模型组、VPA组、低剂量Q808-L组(40mg/kg)和高剂量Q808-H组(80mg/kg),分别灌胃给予抗癫痫药VPA和Q808药物,对照组及癫痫模型组均生理盐水灌胃,每日一次。第28天后断头取海马,取部海马组织分用4%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋和切片,取部海马组织在-80℃冻存备用。应用HE染色法观测海马神经元病理变化,利用蛋白免疫印迹法和免疫组化染色法检测各组大鼠海马组织中Apaf-1、caspase-9和caspase-3蛋白表达及分布。结果:1.HE染色结果:对照组海马组织形态结构完整、细胞排列整齐,模型组层次结构和细胞排列紊乱,数量明显减少,细胞间隔增宽,细胞肿胀,轮廓模糊,胞质深染,成空泡样变,核固缩和碎裂。Q808组海马组织中的细胞数量增加,间隙明显缩小,排列整齐,核固缩和碎裂明显减轻,其中Q808-H组较Q808-L组更为明显。2.免疫组化染色结果:TLE组海马组织中caspase-3蛋白表达高于正常对照组(P<0.05);与TLE组比较,Q808组和VPA组caspase-3蛋白表达降低,其中Q808-H组与VPA组最明显(P<0.01),Q808-H组较Q808-L组降低更显著(P<0.05),与Q808-H组相比VPA组表达显著降低(P<0.05)。3.蛋白免疫印迹法:TLE组海马组织中Apaf-1、caspase-9和caspase-3蛋白表达均明显高于正常对照组(P<0.05),与TLE组比较,Q808组和VPA组3种蛋白的表达降低,其中Q808-H组与VPA组最明显(P<0.01),且Q808-H组较Q808-L组3种蛋白表达降低更显著(P<0.05),与Q808-H组相比VPA组3种蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:1.Q808可改善氯化锂-匹罗卡品模型中大鼠海马组织的病理改变;2.Q808可部分下调Apaf-1、caspase-9和caspase-3蛋白表达,提示具有一定的神经元保护作用。
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