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背景PD-1分子作为重要的免疫负性分子,参与了机体的免疫调节和对微环境的稳定。在肿瘤发病机制中,往往因为免疫细胞无能,缺乏对肿瘤细胞的及时清除,PD-1抗体可以通过阻断抑制信号,部分恢复免疫细胞杀伤功能。本论文主要将利用PD-1抗体检测肺癌血液样本,同时研究该PD-1抗体对CIK细胞杀伤肺癌肿瘤细胞的效应。目的评价PD-1抗体检测肺癌血液样本的特异性和敏感性,观察PD-1在体外免疫细胞杀伤肿瘤细胞实验中的生物学功能。方法FCM检测PD-1抗体对肺癌患者PBMC膜PD-1识别,ELISA检测PD-1抗体对肺癌患者血浆中可溶性PD-1识别,绘制ROC曲线计算PD-1抗体检测的特异性和敏感性。分离培养CIK细胞,测定对肺癌肿瘤细胞系A549和H1299,以及原代肺癌细胞的杀伤实验中,加入PD-1抗体后对杀伤效率的影响。结果1)PD-1抗体识别到肺癌患者PBMC的膜表面PD-1表达(18.97%±2.32%)高于健康人(11.10%±1.05%);中晚期患者的膜PD-1表达(23.07%±2.82%)高于早期患者(12.81%±3.34%);肺癌患者的可溶性PD-1表达(1.66ng/ml±0.21ng/ml)低于健康人(3.01ng/ml±0.36ng/ml);中晚期患者的可溶性PD-1表达(1.14ng/ml±0.18ng/ml)低于早期患者(2.43ng/ml±0.34ng/ml)。PD-1抗体检测膜型PD-1时,ROC曲线下面积高于0.7,敏感度为0.667,特异性为0.867。2)PD-1分子在CIK细胞上的表达率为25.6%,加入PD-1抗体后,A549组杀伤率从31.2%±5.5%升高为57.3%±8.1%,H1299组杀伤率从34.4%±5.9增高至49.8%±5.7%,早期肺癌组杀伤率从35.5%±4.5%增高为59.0±4.3%,中晚期肺癌组杀伤率从31.8%±4.0%变为54.0%±4.9%。结论PD-1抗体检测肺癌患者血液PBMC膜型PD-1分子具有一定临床诊断意义,在免疫细胞杀伤肺癌肿瘤细胞时,加入PD-1抗体可以适当提高免疫杀伤活性。