目的:利用CRISPR/Cas9技术简单高效地激活内源性基因表达的研究。方法:通过合成的sgRNA表达盒去指导一个包含转录激活因子(VP64,p65和Rta)并且无核酸酶的Cas9复合物,从而进行位点特异性诱导内源性基因的表达。我们设计了SpCas9 sgRNA表达盒与SaCas9 sgRNA表达盒,通过诱导人和大鼠细胞中的多个基因,测试两种CRISPR激活系统(dSpCas9-VPR,dSaCas9-VPR)。我们通过pmaxGFP转染法检测不同细胞的转染效率,使用CRISPR/Cas9激活剂进行基因激活,应用qPCR比较目的基因的相对表达量,用免疫细胞化学方法检测被转录因子诱导的基因表达。结果:两种CRISPR/Cas9均可在人体细胞中有效诱导激活六种不同的神经发育基因(CRX,RORB,RAX,OTX2,ASCL1和NEUROD1),而在大鼠细胞诱导激活三种不同基因(Ascl1,Neurod1和Nrl)表现出更多不确定性以及低效的基因诱导水平。结论:本研究提供了一种简单地使用CRISPR/Cas9激活剂有效激活内源性基因表达的方法,该方法能优化实验室工作流程,有助于推动分子细胞生物学方面的功能获得性研究。