抗球虫中药的筛选及姜黄素复方制剂的研究

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鸡球虫病是一种常见的寄生性原虫病,该病给世界养禽业带来了巨大的经济损失。鸡的艾美耳球虫公认的有七种,其中柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)是临床发病最多、危害最大的鸡球虫之一。鸡球虫病的防治仍主要依靠化学药物,但随着化学药物的广泛使用,耐药虫株不断产生、动物源食品中兽药残留等问题越来越多,临床球虫病的防治日益困难。中兽药多来自天然植物,绿色安全,组分多样,不易产生耐药性,是鸡球虫病防治研究新方向。本论文筛选出了对鸡柔嫩艾美尔球虫有显著抑制作用的单味药材,组成高效的复方制剂,并对复方制剂的抗球虫效果进行了全面评估。首先开展了20种单味中药的体外球虫卵囊抑制试验,结果显示姜黄素及仙鹤草、青蒿、常山、苦参这四种中药提取液对鸡柔嫩艾美尔球虫卵囊孢子化呈明显抑制作用,在球虫卵囊体外孵育6 d后其卵囊孢子化率仅34.32%~47.76%。开展了五种对球虫卵囊有较好抑制作用的药材组合筛选,以姜黄素和仙鹤草为固定组方,建立了三种不同的复方,并开展了三个复方对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊抑制试验,结果显示添加三种复方药液的球虫卵囊体外孢子化率分别为29.15%、42.74%、44.56%,而地克珠利对照组的球虫卵囊孢子化率为27.69%,筛选出方剂一为最佳组方。选取40只健康小鼠,均分为五组,分别以50、40、30、20、10 m L/kg体重的剂量灌胃方剂一药液,每天一次,连续两天,测定方剂一药液的半数致死量(LD50)。结果显示方剂一药液对小鼠的半数致死量大于50 m L/kg体重。在安全性试验中,40只健康小鼠以30 m L/kg的剂量连续7天,每天灌胃两次方剂一药液观察小鼠的临床与解剖特征。结果显示实验小鼠未出现毒性反应,剖检各脏器也无异常病变,说明筛选的方剂一药液安全性较高。开展了以姜黄素为主的中药复方制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫的攻虫防治试验。120只14日龄的鸡,分为六组,四组为试验组,分别在口服柔嫩艾美耳球虫后一天,饲料中给予10、15、20 g/kg剂量的中药方剂一和0.2 g/kg剂量的0.5%地克珠利预混剂,评价抗球虫效果,另外两组分别为空白对照组和阳性对照组。结果显示中药方剂一不同的添加量均有一定的抗球虫效果,其中以20 g/kg剂量添加时,抗球虫效果最佳,其抗球虫指数为163.71,而对照化药地克珠利组的抗球虫指数为173.15。表明筛选的中药复方具有良好的抗球虫效果。最后本研究对筛选的以姜黄素为主的中药复方制剂进行了预防鸡球虫病的田间扩大试验。将600只1日龄矮脚黄鸡随机均分成三组,分别为方剂一给药组,给药剂量为20 g/kg饲料,连续添加至上市;同时设置化药对照组,每公斤饲料中添加1%的马杜霉素铵预混剂0.45 g,添加至上市前5天;另外一组为空白对照组。结果显示在饲料连续添加20 g/kg方剂一,能够促进矮脚黄鸡的生长,降低料重比,且抗球虫效果不亚于常规预防性抗球虫药马杜霉素。
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