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新型中药促孕灌注液(New type of fertility-promoting intrauterine infusion liquid,简称新促孕液,NFPL)是本研究室研制成功的新中兽药,用传统的水提醇沉法制备,具有清热燥湿、活血化瘀、补肾壮阳、催情促孕等功效,对于防治母畜子宫内膜炎、卵巢静止和持久黄体性不孕症效果可靠。近年来,中药提取又涌现出许多新技术,如半仿生提取法(Semi-bionic Extraction Method, SBE)。据报道,SBE法可以提高提取液中有效成分的含量。本研究优选了新促孕液半仿生提取的条件,比较了半仿生提取对新促孕液有效成分含量和抑茵效果的影响,旨在为提高新促孕液的有效成分含量和疗效提供理论依据。试验分为以下5部分。
试验1.新促孕液半仿生提取工艺条件的优选以淫羊藿苷、小檗碱、总生物碱和干浸膏重量为指标,用均匀设计法优选了新促孕液半仿生提取的条件。结果表明,第1、2、3煎水的pH值分别为2.0、7.5和9.0,煎煮时间分别为1.5h、1.0h和1.0h是最佳条件,此条件下提取新促孕液的提取率接近于理论值。
试验2.新促孕液半仿生提取分煎合煎方式的优选将新促孕液的4种组分药排列成15种组合,分别用半仿生法提取,以成品药液中淫羊藿苷、小檗碱、总生物碱和干浸膏的含量为指标综合判定提取效果。结果表明,以黄柏与淫羊藿合煎、益母草与红花合煎、然后合并的提取方式最佳。
试验3.新促孕液半仿生提取醇沉浓度的优选 用上述条件半仿生提取新促孕液,比较60%、70%、80%三种醇沉浓度分别沉淀1次或2次对提取液中淫羊藿苷、小檗碱,总生物碱和干浸膏含量的影响。结果,醇沉浓度为70%、沉淀1次所得提取液的综合评价Y值最大,效果最佳。
试验4.半仿生提取对新促孕液有效成分含量的影响-分别采用水提取(WE)、半仿生提取(SBE)、水提醇沉(WAE)和半仿生水提醇沉(SBAE)法提取新促孕液,测定提取液中淫羊藿苷。小檗碱、总生物碱和干浸膏的含量,比较4种提取方法的提取效果。结果表明,4个指标和4种方法的综合评价Y值的排序为SBE法>WE法,SBAE法>WAE法。提示半仿生提取法优于水提取法,半仿生水提醇沉法优于水提醇沉法。
试验5.半仿生提取对新促孕液抑茵效果的影响 比较了分别用水提取(WE)、半仿生提取(SBE)、水提醇沉(WAE)和半仿生水提醇沉(SBAE)法提取的4种新促孕液提取液对子宫内膜炎主要致病菌的体外抑菌作用。结果,4种提取方法的抑菌效果排序为SBE法>WE法,SBAE法>WAE法,表明SBE能提高新促孕液的功效。