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目的:观察胆红素对大脑皮层神经元的影响及BDNF封闭抗体对神经元活性的影响。证明胆红素损伤时,机体能启动内源性保护作用。间接证明BDNF对胆红素损伤神经元的保护作用,为临床提供理论依据。
方法:取孕17-19天的SD大鼠,取胎鼠大脑皮质进行神经元原代培养。第8天后进行神经元免疫组化鉴定,随机分为5组:对照组,胆红素组,BDNF封闭抗体1mg/L组,BDNF封闭抗体2mg/L组,BDNF封闭抗体4mg/L组。每组设4个时间点,每个时间点设8个复孔。分别于各个时间点收集细胞用相差显微镜观察细胞形态、噻唑盐比色法(MTT)、流式细胞术检测细胞活力及凋亡率变化。
结果:与对照组比较,胆红素组神经元细胞活性明显下降,细胞凋亡率显著增加;应用BDNF封闭抗体预处理后胆红素对神经元的损伤明显加重,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),与胆红素组相比。不同浓度的BDNF抗体对细胞活性的影响无显著差别(P>0.05)。
结论:胆红素能够造成大鼠大脑皮质神经元损伤并诱导其凋亡,BDNF封闭抗体预处理后胆红素能加重对大脑皮质神经元的损伤作用。这也间接证明了内源性BDNF对胆红素损伤神经元具有保护作用。BDNF封闭抗体的促损伤作用与剂量无关。这是否因为内源性BDNF量较少,小剂量BDNF抗体足以阻断其保护作用有待于进一步研究。