几种糖脂代谢中间产物对小鼠脂肪细胞脂肪代谢的影响

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fuyao698
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葡萄糖作为动物机体主要能量来源,高水平的葡萄糖能够促进脂肪细胞内甘油三酯的合成,但其代谢产物丙二酰辅酶A、丙酮酸、柠檬酸和磷酸二羟基丙酮对甘油三酯代谢的影响尚不清楚;因此,本研究主要探索这几种物质对脂肪细胞甘油三酯代谢的影响,目的是促进甘油三酯的合成。
  试验一:目的旨在研究丙二酰CoA对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物的影响;将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞做为研究对象,在诱导培养第14d,加入含0μmol/L(ck组)、20μmol/L(试验Ⅰ组)、50μmol/L(试验Ⅱ组)、200μmol/L(试验Ⅲ组)的丙二酰CoA完全培养基培养细胞于0h、36h、72h收集细胞进行ELISA及后续检测。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组合成的TG量极显著高出对照组(ck)水平(P<0.01);试验各组ACC、、FAS、柠檬酸等含量均极显著高出对照组水平(P<0.01);试验各组HSL、CPT1、FFA及乙酰CoA等含量均极显著低于对照组水平(P<0.01)。丙二酰CoA能够促进小鼠脂肪细胞甘油三酯的合成和沉积,且丙二酰CoA的浓度在一定范围内随着时间和甘油三酯合成量成正相关;50μmol/L丙二酰CoA为最佳浓度。
  试验二:目的旨在研究柠檬酸对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物的影响;将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞做为研究对象,在诱导培养第14d,加入含0μmol/L(ck组)、20μmol/L(试验Ⅰ组)、50μmol/L(试验Ⅱ组)、200μmol/L(试验Ⅲ组)的柠檬酸完全培养基培养细胞于0h、36h、72h收集细胞进行ELISA及后续检测。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组合成的TG量显著高出对照组(ck)水平(P<0.05);试验各组ACC和FAS含量均极显著高出对照组水平(P<0.01);试验各组HSL、CPT1、FFA及乙酰CoA等含量均极显著低于对照组水平(P<0.01)。柠檬酸能够促进小鼠脂肪细胞甘油三酯的合成和沉积,20μmol/L柠檬酸为最佳浓度。
  试验三:目的旨在研究磷酸二羟基丙酮对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物的影响;将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞做为研究对象,在诱导培养第14d,加入含0μmol/L(ck组)、20μmol/L(试验Ⅰ组)、50μmol/L(试验Ⅱ组)、200μmol/L(试验Ⅲ组)的磷酸二羟基丙酮完全培养基培养细胞于0h、36h、72h收集细胞进行ELISA及后续检测。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组合成的TG量极显著高出对照组(ck)水平(P<0.01);试验各组G6PD、DLAT、DLD和FAS含量均极显著高出对照组水平(P<0.01);试验各组HSL、CPT1和FFA含量均极显著低于对照组水平(P<0.01)。磷酸二羟基丙酮能够促进小鼠脂肪细胞甘油三酯的合成和沉积,20μmol/L为最佳浓度。
  试验四:目的旨在研究丙酮酸对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物的影响;将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞做为研究对象,在诱导培养第14d,加入含0μmol/L(ck组)、20μmol/L(试验Ⅰ组)、50μmol/L(试验Ⅱ组)、200μmol/L(试验Ⅲ组)的丙酮酸完全培养基培养细胞于0h、36h、72h收集细胞进行ELISA及后续检测。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组合成的TG量显著高出对照组(ck)水平(P<0.05);试验各组G6PD、PDHE1、DLAT、DLD和FAS含量均极显著高出对照组水平(P<0.01);试验各组HSL、CPT1和FFA含量均极显著低于对照组水平(P<0.01)。丙酮酸能够促进小鼠脂肪细胞甘油三酯的合成和沉积。
  试验五:目的旨在研究几种不同物质的组合对小鼠脂肪细胞甘油三酯代谢的影响,并确定最佳的物质组合;将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞做为研究对象,在诱导培养第14d,在细胞培养液中加入不同剂量的不同种物质组合作为试验组,试验Ⅰ组:50μmol/L丙二酰CoA,试验Ⅱ组:50μmol/L丙二酰CoA+20μmol/L柠檬酸+20μmol/L磷酸二羟基丙酮,试验Ⅲ组:50μmol/L丙二酰CoA+20μmol/L磷酸二羟基丙酮+20μmol/L丙酮酸,试验Ⅳ组:50μmol/L丙二酰CoA+20μmol/L柠檬酸+20μmol/L丙酮酸以及空白对照组(ck组),并0h、24h、48h和72h收集细胞及培养液冻存、以备送检。试验各组TG含量均极显著高于对照组(P<0.01),试验Ⅳ、Ⅲ与Ⅱ组均极显著高于试验Ⅰ组(P<0.01),且试验Ⅳ极显著高于试验Ⅲ组和试验Ⅱ组(P<0.01)。
  在促进小鼠脂肪细胞TG的沉积中,试验Ⅳ组效果最佳,其次是试验Ⅱ组与Ⅲ组,最后是试验Ⅰ组;TG的含量与其合成过程中G6PD、ALD、丙酮酸脱氢酶系、ACC、FAS的含量成正相关,与其分解代谢中HSLCPT1、DG、FFA乙酰CoA的含量呈负相关;促进细胞内TG的合成与沉积,除了增加细胞内丙二酰CoA的浓度,促进柠檬酸-丙酮酸循环也能够增加TG的合成与沉积,提高酯化反应中α-磷酸甘油的含量也能够促进TG的合成与沉积。
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