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本试验通过对海蓝灰蛋鸡注射外源性重组小鼠瘦素,研究瘦素对蛋鸡血液生化指标、卵巢发育、摄食行为及瘦素受体基因表达的影响,探讨瘦素对蛋鸡能量代谢、卵巢发育和行为学参数变化的影响。试验选择25只30周龄体重相近(1560 g±114 g)的蛋鸡随机分为5组:(Ⅰ)自由摄食组;(Ⅱ)禁食对照组;(Ⅲ)禁食+50μg/kg BW/d瘦素;(Ⅳ)禁食+200μ.g/kg BW/d瘦素;(Ⅴ)禁食+400μg/kg B W/d瘦素。每天记录蛋鸡体重,采食量,饮水量。 (1)外源性重组小鼠瘦素对蛋鸡能量代谢及行为变化的影响 蛋鸡体重、腹脂率:所有的禁食组蛋鸡体重在两天的禁食之后出现体重显著下降的现象,试验Ⅱ~Ⅴ组蛋鸡体重分别为自由采食组体重的92.24%、99.18%、98.53%、95.30%,禁食对照组相对于自由采食组下降极显著(P<0.01),相对于试验Ⅲ、Ⅳ组下降显著(P<0.05)。其余各组间均无明显差异(P>0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组腹脂率明显低于试验Ⅴ组,仅为试验Ⅴ组的58.98%、45.85%、58.71%,差异显著(P<0.05),其余各组间均无明显差异(P>0.05)。 肠绒毛长度、隐窝深度、V/C:禁食对照组与自由摄食组相比,十二指肠平均绒毛长度显著短了16.24%(P<0.05),隐窝深度显著上升了22.60%(P<0.05),V/C平均值显著下降了35.40%(P<0.05)。试验Ⅲ~Ⅴ组绒毛长度、V/C值均低于自由摄食组,隐窝深度高于此组(P>0.05)。禁食对照组与自由摄食组相比空肠平均绒毛长度显著短了14.75%(P<0.05),隐窝深度显著上升了21.83%(P<0.05),试验Ⅲ~Ⅴ组绒毛长度均低于自由摄食组,隐窝深度高于此组(P>0.05),试验Ⅱ~Ⅴ组V/C值均低于自由摄食组(P>0.05)。试验Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的回肠绒毛长度、V/C值均高于禁食对照组(P>0.05),隐窝深度均低于禁食对照组(P>0.05)。 葡萄糖、甘油三酯:葡萄糖、甘油三酯含量随着瘦素注射量的增加整体上呈下降的趋势。葡萄糖含量,试验Ⅲ、Ⅳ组分别为禁食对照组的61.15%,59.59%,差异显著(P<0.05),而试验Ⅱ~Ⅴ组与自由摄食组无明显差异(P>0.05)。各组甘油三酯含量无明显变化,各组之间差异不显著(P>0.05)。 蛋鸡采食量、采食频次、饮水量、饮食频次:随着外源性重组小鼠瘦素注射量的增加,四个禁食组的采食量、采食频次、饮水量、饮水频次逐渐下降。试验Ⅲ~Ⅴ组采食量分别为禁食对照组的92.86%、89.89%、75.46%。试验Ⅴ组与禁食对照组相比下降差异显著(P<0.05),试验Ⅱ~Ⅴ组与自由摄食组差异不显著(P>0.05);试验Ⅲ~Ⅴ组采食频次分别为禁食对照组的87.09%、65.52%、63.00%,下降极显著(P<0.01),试验Ⅳ、Ⅴ组采食频次与自由摄食组相比下降差异极显著(P<0.01);试验Ⅲ~Ⅴ组饮水量分别为禁食对照组的82.83%、71.20%、57.65%。试验Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组饮水量与禁食对照组相比差异显著(P<0.05);试验Ⅲ~Ⅴ组饮水频次分别为禁食对照组的84.24%、74.03%、28.53%,试验Ⅱ~Ⅴ组逐渐降低,各组之间差异极显著(P<0.01)。摄食时间:蛋鸡的采食时间和饮水时间随着瘦素注射量增加均呈现先增后减的变化,采食时间和饮水时间在试验Ⅲ组均达到最大值后呈现较大幅度的下降,Ⅳ组饮水时间与Ⅲ组饮水时间相比下降显著(P<0.05)。四个禁食试验组采食、饮水时间基本不低于自由摄食组。 其他行为:各试验组蛋鸡梳羽、伸展、转身等行为发生次数无明显变化规律,差异不显著(P>0.05)。争斗发生次数,试验Ⅲ~Ⅴ组蛋鸡的争斗次数与禁食对照组相比下降极显著(P<0.01)。 (2)外源性重组小鼠瘦素对蛋鸡卵巢生殖机能的影响 蛋鸡卵巢比重、卵巢基质比重、输卵管比重、输卵管长度:卵巢比重,禁食对照组明显低于自由摄食组,仅为此组的42.86%,差异显著(P<0.01);输卵管比重,禁食对照组明显低于自由摄食组,为此组的65.02%,差异显著(P<0.05)。禁食对照组卵巢基质比重、输卵管比重、输卵管长度等指标均比试验Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组低,各组之间差异不显著(P>0.05)。 各级卵泡重量和数量:禁食对照组的大黄卵泡(卵泡直径>22-30mm)的数量以及重量分别为自由摄食组的25.00%、12.60%,差异显著(P<0.05)。试验Ⅰ~Ⅴ组之间白卵泡、黄样卵泡、小黄卵泡、中黄卵泡的数量和重量没有明显差异(P>0.05)。 雌二醇、孕酮:雌二醇,相对于自由摄食组,试验Ⅱ~Ⅴ组雌二醇在第三天时血浆中E2水平显著降低(P<0.05),禁食两天后重新给蛋鸡喂食,试验Ⅱ~Ⅴ中E2水平得到显著提高(P<0.05)。试验Ⅲ、Ⅳ组中E2水平比试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ组高,差异显著(P<0.05)。孕酮,与自由摄食组相比,两天(第二天、第三天)的禁食使试验Ⅱ~Ⅴ血浆中孕酮水平显著下降(P<0.05),第四天恢复自由采食后,试验Ⅲ、Ⅳ组中蛋鸡血浆孕酮水平逐渐提高,然后降低,试验Ⅱ、Ⅴ组没有明显的变化。(3)外源性重组小鼠瘦素对蛋鸡肝脏OB-R基因表达的影响 试验Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组OB-R基因表达量分别为禁食对照组的35.19%、6.17%、7.41%、3.09%,试验各组之间OB-R基因表达量差异不显著(P>0.05)。