柑橘溃疡病（Citrus bacterial canker,CBC）是由Xanthomonas axonopodis pv.citri（Xac）地毯草黄单胞柑橘致病变种引起的细菌性植物病害,一些毒性基因可以通过调控分泌的胞外多糖、胞外酶、III型分泌系统分泌的效应蛋白等毒性因子来调控细菌的生物膜、运动性以及致病性等生物学功能,从而严重危害柑橘的生产。本文以菌种Xacjx-6为出发菌利用同源重组法分别构建了ΔXAC1991、ΔXAC1992、ΔXAC1994、ΔXAC2810和ΔXAC1570五个突变体,以期揭示Xac jx-6部分突变体的致病机理,实验结果如下:ΔXAC1991、ΔXAC1992和ΔXAC1994突变体菌株的胞外多糖产量较野生型明显升高,运动性水平较野生型降低,而ΔXAC2810和ΔXAC1570突变体菌株无论产生胞外多糖的能力,还是运动性能力与野生型相比都没有明显的变化。挑选ΔXAC1991、ΔXAC1992和ΔXAC1994三个突变体继续研究,ΔXAC1991、ΔXAC1992和ΔXAC1994突变体菌株的胞外蛋白酶活性有所降低,而对胞外淀粉酶和纤维素酶的活性没有影响,在对烟草的过敏性反应检测中,三个突变体对烟草的过敏性反应略微升高;XAC1991和XAC1992蛋白荧光定位在细菌细胞的两极位置,而XAC1994蛋白荧光定位在细胞膜的边缘,透射电镜观察,发现ΔXAC1991、ΔXAC1992和ΔXAC1994突变体菌株的鞭毛都出现了缺失现象,对这三个突变体菌株的RNA-seq测序结果分析以及Q-PCR实验验证,结果表明,ΔXAC1991、ΔXAC1992和ΔXAC1994突变体菌株共同下调一些预测的转录单元基因的表达量,如che Ache Z-che Y-fli A-fle N-flh F、细菌鞭毛形成相关的flg L-flg K-flg J-flg I-flg H-flg G和che W-par A-mot B-mot A等基因的表达,这三个突变体菌株还同时下调che A-XAC1903、che A-XAC1930、che A-XAC2865、che W-XAC1906、che B1、che R、和che R2等与趋化性相关的基因的表达量;大肠杆菌中与XAC1992蛋白同源的蛋白Pde R蛋白通过和其余含有GGDEF结构域的蛋白相互作用,从而使细胞内的c-di-GMP的浓度发生改变,从而影响细菌的致病性,于是我们将XAC1992基因分别与载体p GBKT7和p GADT7构建重组质粒,检测XAC1992与Xac jx-6基因组中其它含有GGDEF结构域基因的蛋白互作情况,结果发现与XAC1992互作的蛋白的有XAC 0258、XAC1420、XAC1570、XAC1939、XAC2810、XAC2897和XAC1991。