【摘 要】
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目的:茯苓多糖是茯苓的主要活性成分,具有多种药理作用,包括抗氧化、抗凋亡和抗癌活性作用。本实验主要研究了茯苓多糖作用RAW 264.7巨噬细胞和肺癌模型小鼠的免疫调节机制。
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目的:茯苓多糖是茯苓的主要活性成分,具有多种药理作用,包括抗氧化、抗凋亡和抗癌活性作用。本实验主要研究了茯苓多糖作用RAW 264.7巨噬细胞和肺癌模型小鼠的免疫调节机制。方法:茯苓多糖分别作用于RAW 264.7巨噬细胞和肺癌模型小鼠后,收集相应的细胞上清和血清,然后用Griess试剂盒检测NO浓度,用CBA的方法检测Th1(IL-2,TNF和IFN-γ)/Th2(IL-4,IL-6和IL-10)/Th17(IL-17A)的浓度。采用qRT-PCR和western blotting的方法检测TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路中的关键节点蛋白和基因的表达。结果:茯苓多糖作用于RAW 264.7巨噬细胞和肺癌模型小鼠以后NO,IL-2,IL-6,IL-17A,TNF和IFN-γ的浓度都明显升高,而IL-4和IL-10的浓度没有明显改变。在体外实验中,我们加入TLR4抑制剂TAK-242观察茯苓多糖作用于RAW 264.7巨噬细胞的效果,发现IL-2,IL-6,IL-17A,TNF,IFN-γ,IL-4和IL-10的浓度都没有明显改变。而体内实验茯苓多糖作用于野生型小鼠之后,小鼠的脏器指数明显升高而瘤重明显降低。对比于空白对照组,体内实验和体外实验中检测出TLR4,MyD88,TRAF-6,p-NF-κB和p-c-JUN的蛋白和基因表达升高均有显著性意义,但TRAM没有明显变化,而茯苓多糖作用于TLR4缺陷小鼠后MyD88,TRAF-6,TRAM,p-NF-κB以及p-c-JUN的表达均无显著性意义。结论:体外和体内实验结果表明茯苓多糖是通过TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路来发挥免疫调节活性的。
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