论文部分内容阅读
不结球白菜（Brassica capmestris ssp.chinensis Makino）又称小白菜、青菜，北方称油菜，起源于中国，是十字花科芸薹种（Brassica capmestris L.）的1个亚种。近年来，不仅北方大量引种栽培，东南亚、日本、美国及欧洲一些国家也广泛引种，已逐渐成为世界性的蔬菜。本研究一方面对不结球白菜新种质细胞质雄性不育系P70-203与其回交父本的植物学特性进行比较分析，另一方面用分子标记技术对不结球白菜雄性不育系P70-203细胞质类型进行鉴定，及杂种一代及进行了纯度鉴定。加快不结球白菜育种进程，为其进一步应用提供了分子依据。
1.不结球白菜细胞质雄性不育系P70-203是本所在育种过程中发现的半不育株，后经回交选育而成。本研究对其植物学特性进行观察测定，结果表明：不育系P70-203生长整齐，植株健壮，幼苗生长正常，不表现黄化，且不育性稳定，不育率不育度均为100％；其花朵开放正常、雌蕊功能健全、雄蕊退化、无花药；蜜腺发育良好、花蜜多、正常能吸引蜜蜂等昆虫正常采蜜传粉；具有优良的植物学性状。以上研究为配制更多优良杂种一代，推广不育系P70-203的应用范围奠定基础。
2.根据OguraCMS、PolimaCMS的不育性状相关的线粒体基因序列设计特异引物，对不结球白菜雄性不育系新种质P70-203及其保持系P60-27-1进行PCR分析。研究结果表明，Polima引物P3/P4，P5/P6在不育系与可育系中均无扩增条带；Ogura引物P1/P2在不育系中扩增出750bp的特异片段，但可育系中无扩增条带。将扩增的特异条带回收并测序，将得到的测序结果在NCBI中进行Blastn同源性比较，结果与青花菜Ogura细胞质雄性不育同源性等均达到99％。从分子角度初步推测：该雄性不育系新种质P70-203具有Ogura细胞质。
3.采用RAPD、SRAP、SSR三种标记技术，对不结球白菜杂交一代08-1-61及双亲进行指纹图谱鉴定。对160个RAPD引物、132对SRAP引物筛选、87对SSR引物筛选结果表明：1条RAPD引物、1对SRAP引物在杂交种扩增双亲的互补特征带，有效地鉴别双亲和杂种F1；2条RAPD引物、1对SRAP引物为偏母型；1条RAPD与1对SRAP引物为偏父型；未筛选出呈多态性的SSR引物。三种标记比较分析，RAPD标记扩增图谱条带较为丰富，其成本低，操作简便，但重复性较差；SSR标记重复性最好，但多态性最低，成本高；SRAP标记扩增图谱条带最丰富，多态性高，重复性好，是种子指纹图谱鉴定的优良手段。