【摘 要】
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山茱萸是我国传统名贵中药材,具有补肾益肝、益气养血、降血糖、抗炎、神经保护等功效。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)是山茱萸的特征性成分,《药典》将莫诺苷、马钱苷作为山茱萸的主要药效成分。本课题针对环烯醚萜苷分离、纯化、鉴定、细胞学评价等多方面进行研究。将山茱萸干燥果实粉碎,经超声提取法进行甲醇提取;粗提物通过D101大孔树脂去除色素等杂质,富集环烯醚萜苷;通过离子阱质谱对提取物主要成分进行初步鉴定,然后
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山茱萸是我国传统名贵中药材,具有补肾益肝、益气养血、降血糖、抗炎、神经保护等功效。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)是山茱萸的特征性成分,《药典》将莫诺苷、马钱苷作为山茱萸的主要药效成分。本课题针对环烯醚萜苷分离、纯化、鉴定、细胞学评价等多方面进行研究。将山茱萸干燥果实粉碎,经超声提取法进行甲醇提取;粗提物通过D101大孔树脂去除色素等杂质,富集环烯醚萜苷;通过离子阱质谱对提取物主要成分进行初步鉴定,然后经高效液相色谱和三重四级杆质谱对其进行定量分析;高浓度葡萄糖诱导血管内皮细胞凋亡,将该提取物以不同浓度加入到细胞培养液中,探究其对细胞增殖、形态、凋亡的作用。研究取得的主要结果如下:1.对CIG提取物进行表征。山茱萸经超声提取和大孔树脂富集,冻干呈粉末状,最终产物中灰分1.6%,含水量5.31%,多糖含量35.44%;经高效液相、质谱分析,可确定四种主要化合物并测定其在提取物中的含量为莫诺苷28.5%,马钱苷20.4%,山茱萸新苷4.5%,獐牙菜苷约2%,环烯醚萜苷总含量超55%;2.针对CIG提取物对细胞增殖活性的作用进行研究。将CIG提取物加入到细胞培养体系中,结果表明适当浓度的CIG可以明显促进血管内皮细胞的增殖活性;3.针对CIG提取物对高糖引起的细胞凋亡的作用进行研究。高浓度的葡萄糖可明显抑制细胞活性,导致细胞萎缩和凋亡;将CIG提取物介入到此诱导体系中,发现适当浓度的CIG可改善细胞形态的萎缩,抑制细胞增殖活性的降低;通过细胞凋亡早晚期的比较,发现CIG的介入可以抑制细胞凋亡,降低细胞凋亡晚期和坏死的比例。超声提取和大孔树脂富集结合可得到纯度较高的山茱萸环烯醚萜苷,将CIG提取物介入细胞培养,可明显改善血管内皮细胞的活性。血管内皮细胞的单层完整性是血管内皮化的关键,其遭到破坏后会导致细胞外基质的裸露,细胞外基质中胶原、不溶性纤维蛋白等会造成血小板迅速凝集,从而形成血栓。山茱萸提取物提高血管内皮细胞的活性,可在一定程度上防止血管内皮细胞脱落和凋亡,促进血管内皮化。高血糖、糖尿病等会导致一系列的心脑血管疾病,原因也和血管内皮细胞环境高糖有关,山茱萸提取物对此类原因造成的血管内皮细胞凋亡具有抑制作用,也可缓解和改善高糖引起的一系列并发症。
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