中国对虾贮藏保鲜过程中肌肉蛋白质组学研究

来源 :浙江工商大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:momoko120
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
中国对虾是我国最主要的对虾品种之一,具有丰富的营养价值、消费量大,在我国广泛养殖;但目前也面临众多水产品共同面临的问题——易腐败变质。因此,人们开发出了各种针对水产品品质进行评价的方法,如感官评价、物理评价、化学评价、微生物评价等,而从水产品中蛋白质的角度进行相关研究的报道较少。近几年来,蛋白质组学发展迅速,其中以双向电泳技术(2-DE)质谱鉴定技术(MS)及其生物信息技术(Bioinformatics)为基础的蛋白质组学技术为蛋白质组学的发展奠定了坚实基础,也为水产品品质评价及形成机理的研究提供了新的思路。借助差异蛋白质组学寻找、筛选并鉴定与中国对虾新鲜度品质相关的蛋白,再通过蛋白数据库及与该蛋白相关的文献报道进行深入分析,探究中国对虾品质变化的生理生化基础,能够为基于蛋白质的中国对虾品质评价提供相关依据。本研究通过对影响中国对虾肌肉蛋白双向电泳的相关技术参数进行比较和优化,建立了中国对虾肌肉蛋白的双向电泳技术体系;并以从贮藏过程中中国对虾样品中提取的低盐溶性蛋白和从保鲜过程中(壳聚糖涂膜保鲜)中国对虾样品中提取的全肌肉蛋白为研究对象,对中国对虾肌肉蛋白变化进行了差异蛋白质组学研究,主要的研究结果如下:1、中国对虾肌肉蛋白双向电泳体系:在第一向(IEF)中,裂解液配方为8M尿素、2M硫脲、4%CHAPS、65mM DTT、0.67%Bio-Lyte, IPG胶条选择pH4-7、长度17cm,蛋白上样体积为300μL上样量120}μg,搭盐桥,等电聚焦时间80000v*h,主动水化方式上样;平衡时间13.5min;在第二向(SDS-PAGE)中,采用12.5%浓度胶进行电泳;使用硝酸银染色,并适当控制显色时间;最后对胶进行扫描获取凝胶图谱,并用PDQuest软件进行分析。该体系能有效提高中国对虾肌肉蛋白质的2-DE图谱分辨率。2、通过SDS-PAGE技术研究中国对虾不同溶解性肌肉蛋白质的变化规律,发现中国对虾的低盐溶性蛋白贮藏过程中部分蛋白发生了较为明显的变化,故应用双向电泳技术对不同贮藏时间的中国对虾低盐溶性蛋白的2-DE图谱进行比较研究,从中筛选出8个差异较为显著的蛋白点进行质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定,鉴定出蛋白:NKG2D。该蛋白是与生物体免疫功能相关的受体,且该蛋白点是贮藏过程中蛋白丰度由多变少的显著差异蛋白点。推测NKG2D受体蛋白是反映中国对虾新鲜度品质变化的相关白之一。3、研究发现壳聚糖涂膜保鲜对中国对虾具有显著保鲜效果,为研究壳聚糖保鲜对中国对虾肌肉蛋白质的影响,应用双向电泳技术对壳聚糖涂膜保鲜与对照组贮藏过程中中国对虾肌肉全蛋白质进行了分析。从三类对比中寻找差异蛋白点:同一冷藏时间保鲜组和对照组的样品2-DE图谱对比、保鲜组样品不同冷藏时间的2-DE图谱对比、对照组样品不同冷藏时间的2-DE图谱对比,从中筛选了8个具有统计意义(P<0.05)的差异蛋白点进行质谱(MALDI-TOF-MS)测定,鉴定出蛋白:ATP-PRT (ATP phosphoribosyltransferase, ATP-磷酸核糖基转移酶)。该蛋白与组氨酸、ATP代谢相关联,推测ATP-PRT是反映中国对虾新鲜度品质变化的相关蛋白之一。
其他文献
目前城市传统旧区更新在历史文化遗产单体保护方面卓有成效,但由于缺乏基于系统性原则对城市尺度内的历史文化遗产进行整合保护,分散的历史文化遗产被周边现代城市肌理隔离出
<正>1临床资料患者,男,45岁,主因"右下腹痛20 d"入院,既往21年前曾行胆总管结石手术,入院查体:T 36.4℃,P 76次/min,R 18次/min,BP 140/100 mmHg,神志清楚,营养中等,皮肤、巩
简述课题的研究背景,描述三轮专家问卷调查的情况,对所获得的数据进行统计分析,应用的指标主要有:等级、专家意见集中度、专家意见协调度、专家积极性系数等。对初步筛选出来
目的探讨社区康复治疗对高血压患者血压及认知行为的影响。方法选取桃源社区健康服务中心98例高血压患者,随机双盲分为试验组与对照组,各49例。试验组给予社区康复治疗,对照
随着市场经济的快速发展和城市化进程的加快,进城务工人员的数量急剧增加。流动人口正在由个体流动转向家庭流动,大量农民工子女随父母来到城市生活。流动儿童问题现已成为学界
本文主要研究公共财政与社会工作服务发展的关系,尝试构建一个覆盖“预算――投入――监督――评估”,以及外部支持的公共财政支持社会工作服务发展的体系。本文从理论上阐述了
针对文献计量研究中存在的来源数据多靠手工录入的瓶颈,介绍一种利用题录文件快速获取文献基本信息的方法。以CNKI中参考文献管理软件RefWorks提供的题录文件为数据来源,应用
最近几年我国政府对农村义务教育不断重视,颁布了诸多关于义务教育公平的政策,这对于缩小城乡义务教育之间的差距发挥了重要作用。但通过分析发现成效并不显著,政府对此负有不可
目的为了研究在早产儿中使用不同的喂养方式对其今后生长发育的影响。方法选择2011年4月-2013年4月在我院住院的早产儿120例,按照喂养方式不同,分为A组、B组、C组,每组共有早
由于户籍制度改革,人口流动加快,西部农村青壮年大规模外出流入到江浙沿海地区,留下行动不便、留恋故土的老人,这些老人往往物质匮乏,精神孤独,生存现状不容乐观。为此,需要