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目的:对SD大鼠坐骨神经钳夹伤模型进行量化研究,确定不同压力对坐骨神经造成的损伤程度,建立符合Sunderland V度分类法中III度坐骨神经度损伤模型。基于坐骨神经III度损伤模型,研究大鼠坐骨神经钳夹伤后不同频率振法刺激对坐骨神经损伤后骨骼肌萎缩的影响,功能恢复与行为学之间的关系,相关神经生长因子变化规律及肌卫星细胞的作用。方法:对JZ06Cr 14厘米止血钳进行压力测定,采用JZ06Cr 14厘米止血钳进行造模,将32只4周龄健康清洁级雄性Sprague Dawley大鼠随机分为4组,空白对照组(8只)及止血钳1扣压力组(8只),2扣压力组(8只),3扣压力组(8只)分别于造模后30min测各组神经传导速度(NCV)并取神经做HE染色进行观察,确定坐骨神经III度损伤模型。模型确定后,将144只体重约180g的雄性SD大鼠随机分为4组,假手术组(n=24),模型组(n=120)。模型组又随机分为模型对照组(n=24),假干预组(n=24),3Hz频率组(n=24),8Hz频率组(n=24),13Hz频率组(n=24)。造模一周后给予不同干预方法进行治疗,行为学指标分别于治疗后7天、14天、21天、28天检测。生化指标分别于治疗后7天、14天、28天处死取材,观察指标:腓肠肌肌湿重比;坐骨神经功能指数;免疫组化(肌卫星细胞;IGF-1;Myo D)。结果:1.周围神经损伤模型定量化研究:(1)对JZ06Cr 14厘米止血钳进行压力测定可知止血钳1扣压力约16N,2扣压力约为31N,3扣压力约为46N。(2)使用16N的压力对坐骨神经进行钳夹,16N压力组(1扣压力组)显示神经传导速度与空白组相比有统计学意义(P<0.05),形态学显示神经纤维平行排列,结构致密,轴突、髓鞘、神经内膜束模都完好无破裂。(3)使用31N的压力对坐骨神经进行钳夹,31N压力组(2扣压力组)显示神经传导速度与空白组、16N压力组之间相比均有统计学意义(P<0.05),形态学显示轴突断裂,神经束膜完整,部分可见神经纤维断裂,神经内膜发生部分损害,结构紊乱。(4)使用46N的压力对坐骨神经进行钳夹,46N压力组(3扣压力组)显示部分神经传导速度无法测出,并与其他各组之间均有统计学意义(P<0.05),形态学可见神经纤维断裂,但是神经外膜与束模均保持完整。2.不同频率振法对大鼠坐骨神经损伤后行为学的影响(1)斜板实验结果表明,3、8、13Hz频率振法均能促进大鼠坐骨神经损伤后肌力的恢复,与假干预组相比有统计学意义(P<0.05);在各治疗时间点,3Hz频率组始终高于其他频率组,在治疗28天时与其他组之间均有统计学意义(P<0.05)。(2)SFI实验统计表明,3、8、13Hz频率振法均能促进大鼠坐骨神经损伤后步态及坐骨神经功能恢复,与假干预组相比均有统计学意义(P<0.05);在治疗14天时8Hz频率组处于最高水平,并与3Hz频率组无统计学意义(P>0.05);在治疗28次之后,3Hz频率组与8、13Hz频率组均有统计学差异(P<0.05),8Hz频率组与13Hz频率组之间无统计学意义(P>0.05)。3.不同频率振法对大鼠坐骨神经损伤后腓肠肌肌萎缩的影响(1)肌湿重比实验结果表明,3、8、13Hz频率组均高于假干预组,提示具有促进大鼠坐骨神经损伤后腓肠肌的修复的作用;治疗14天时,13Hz频率组高于3、8Hz频率组,但相互之间无统计学意义(P>0.05);在治疗28天时,3Hz频率组水平最高,并与8、13Hz频率组之间均有统计学差异(P<0.05),但8Hz频率组与13Hz频率组之间无统计学差异(P>0.05)。(2)IGF-1阳性表达结果表明,3、8、13Hz频率组均高于假干预组,提示具有促进大鼠坐骨神经损伤后腓肠肌IGF-1表达的作用;治疗7天时,8Hz频率组高于3、13Hz频率组,并与13Hz频率组有统计学差异(P<0.05);治疗28天时,3Hz频率组处于最高水平,且与8、13Hz频率组之间均有统计意义(P<0.05)。(3)Myo D阳性表达结果表明,3、8、13Hz频率组均高于假干预组,提示具有促进大鼠坐骨神经损伤后腓肠肌Myo D表达的作用;治疗7天时,8Hz频率组处于最高水平,且与3Hz频率组存在统计学差异(P<0.05);治疗14天时,13Hz频率组处于最高水平,且与8Hz频率组纯在统计学差异(P<0.05);治疗28天时,3Hz频率组水平最高,但与其他各组之间均无统计学意义(P<0.05)。(4)肌卫星细胞阳性表达结果表明,3、8、13Hz频率组均高于假干预组,提示具有促进大鼠坐骨神经损伤后腓肠肌肌卫星细胞分裂、增殖的作用。治疗7天时,8Hz频率组处于最高水平,且各频率组之间相互均有统计学差异(P<0.05);治疗14天时,13Hz频率组处于最高水平,且各频率组之间相互均有统计学差异(P<0.05);治疗28天时,3Hz频率组处于最高水平,且各频率组之间相互均有统计学差异(P<0.05)。结论:1.约16N压力坐骨神经钳夹伤模型符合Sunderland I度损伤。2.约31N压力坐骨神经钳夹伤模型符合Sunderland II或III度损伤。3.约46N压力坐骨神经钳夹伤模型符合Sunderland III度损伤。4.3、8、13Hz频率振法均可增大大鼠斜板实验的角度,缓解周围神经损伤后肌力下降,改善下肢肌力,3Hz频率振法更能促进肌力的恢复。5.3、8、13Hz频率振法均可增大SFI值,改善坐骨神经损伤后步态,促进运动功能的恢复。6.3、8、13Hz频率振法均可以有效减缓骨骼肌肌湿重比的下降,缓解骨骼肌肌萎缩状态,促进骨骼肌修复。7.3、8、13Hz频率振法均可以有效促进IGF-1、Myo D的表达,加速肌卫星细胞的增殖与分化,缓解骨骼肌肌萎缩状态。8.整体来看,3Hz频率组更能促进肌力的恢复,改善坐骨神经损伤后步态,促进运动功能的恢复,加速IGF-1、Myo D的表达,加速肌卫星细胞的增殖与分化,缓解骨骼肌肌萎缩状态。分阶段观察发现3、8、13Hz频率频率振法对骨骼肌修复的速率在不同治疗时间有一定的差异,应根据治疗时间选择合适的治疗方案。