目的分析SPCA1在全脑缺血-再灌注SD大鼠脑组织神经细胞中的表达,并探讨其与脑组织缺血再灌注过程中胞内Ca2+浓度的可能关系。方法通过阻塞大鼠四血管(双侧椎动脉,双侧颈总动脉)建立SD大鼠的全脑缺血-再灌注模型；将120只(均为雄性、体重为200±20g)大鼠随机分为正常对照组,假手术组,缺血组和再灌注组(再灌注3小时、6小时、24小时、3天、7天)。随后按缺血-再灌注不同时间点分别处死动物,快速取脑组织制成标本。采用苏木精-伊红(H-E)和尼氏(Nissl)染色方法观察神经细胞形态和数目的变化；采用免疫荧光抗体标记法鉴定SPCA1在皮层神经细胞中定位与表达强度,并采用Western Blot分析来予以补充验证；采用Fura-2负载的荧光分光光度法对匀浆后神经细胞内与分离高尔基膜泡内Ca2+浓度进行测定。全部数据用SPSS15.0进行统计分析。结果1.全脑组织的H-E染色和海马区神经细胞的尼氏染色结果显示全脑缺血-再灌注导致脑组织大面积受损,皮层和海马区神经细胞数量明显减少,胞体肿胀且形态由多角形转变为近球形,；在再灌注后期,尤其是缺血再灌注7天后,皮层神经细胞周围形成空泡,海马区神经细胞分离脱失。2.SPCA1的荧光免疫定位和Western Blot的结果显示全脑缺血再灌注后SD大鼠脑组织各部分的神经细胞中SPCA1的表达水平呈现‘低-高-低”的趋势,即缺血和再灌注3h的SPCA1水平偏低,而在再灌注6h迅速达到最高,而后缓缓下降至比正常水平低。3.Fura-2负载荧光分光光度法测定神经细胞内和分离高尔基膜泡内Ca2+浓度的结果显示胞内Ca2+浓度在缺血时即开始迅速升高,再灌注3h后即达到最高值,而后略有下降但仍然维持高于正常2倍以上的高浓度；分离高尔基体膜泡的Ca2+浓度则与胞内Ca2+浓度变化趋势相反,在缺血和再灌注早期浓度低,而再灌注24h后则处于高水平。结论1.脑组织神经细胞的SPCA1水平与缺血-再灌注损伤存在明显的应答关系。2.脑组织神经细胞在缺血和再灌注过程中始终处于钙超载状态,但此状态在再灌注后期略有下降；结果提示高尔基体作为胞内钙库参与了钙超载的形成和缓解。3.结合SPCA1的表达模式和高尔基体在钙超载形成与缓解中的作用,可以认为高尔基体上的SPCA1在缺血-再灌注过程中对钙超载的缓解发挥了一定作用。