无机诱导因子骨组织工程支架材料相容性的实验研究

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目的 多年临床证明,自体骨移植是治疗骨缺损的最佳方法,但自体骨移植是以牺牲健康组织为代价的,且自体骨来源有限,取骨区有一定的并发症。异体骨移植有优越的组织学特点,但存在免疫排斥反应,容易感染病毒,而且制样、处理和存储的成本相对较高。近年来蓬勃发展的组织工程学为骨组织缺损的修复提供了新的思路和方法。骨髓基质细胞由于其分化多能性的特性,被认为是骨缺损修复较好的的种子细胞。且通过各国科学家们十年来的不懈努力,骨修复材料的研究也取得了长足的进步。在组织工程学中,生物可降解材料与相关细胞间生物相容性的研究是该学科中的一个重要课题。本实验有以下两个目的: 1.生物相容性和安全性是生物材料应用于临床首先必须面对的问题。通过对无机诱导因子骨组织工程支架材料的体外实验和体内植入实验,来研究其生物相容性和和安全性,为骨组织工程中生物材料的选择提供依据,为其在临床应用作前期准备。 2.通过对成人骨髓基质细胞的体外培养,建立适合本实验室的培养体系,为建立体外工程化骨结构打下基础。 方法 以健康成人志愿者为对象,9例,从髂前上嵴抽取5~10ml骨髓,并与淋巴细胞分离液混合,梯度离心后(2500r/min)30min,吸取中层单个核细胞层;接种于50ml培养瓶中,置于37℃、含体积分数为5%CO2湿化空气的孵箱中进行原代培养。原代培养至第10~12d,细胞汇合成单层(细胞量约为2×105),进行传代培养。将生长状态良好的第2~4代骨髓基质细胞按5×103/cm2接种到50ml培养瓶中继续培养并分组;采用浸提法制备无机诱导因子复合材料的培养液浸提液,实验组组加入材料浸提液,对照组加入完全培养基,通过镜下观察细胞形态、MTT比
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