启动子是转录水平上重要的调控元件。近些年,随着植物基因工程研究的愈发深入,组织特异表达启动子逐渐成为研究热点。利用组织特异型启动子可以避免一些在使用组成型启动子驱动基因表达时遇到的一些负面影响。水稻是重要的粮食作物之一,亦是通过全基因组测序的模式植物。本研究的主要内容是采用组织特异GUS染色的方法从水稻T-DNA突变体中分离克隆出维管束特异表达启动子和验证其在维管束启动基因表达的性能。其目的是通过对水稻维管束特异表达启动子的探究,为水稻基因工程研究提供帮助。具体的研究内容及结果如下:1.对GUS染色筛选出的来自水稻“日本晴”背景的T-DNA突变体(增强子捕获系)111个株系的下一代植株,经GUS染色,获得维管束(鞘)特异性染色的株系共计72个。2.采用hiTAIL-PCR实验和NCBI数据库序列比对,寻找到17个株系的T-DNA插入位点。3.进一步基于Ensembl Plants分析,确定插入位点在结构基因区段内且GUS表达方向与该基因表达方向相同的材料共计7个株系,对这些基因上游的启动序列进行Plant CARE分析,发现7个启动子序列中都含有多种顺式作用元件。4.克隆启动子DNA序列,融合了报告基因GUS构建了7个表达载体。5.采用烟草瞬时表达实验和水稻转化实验对克隆到的7个启动子的功能进行验证:其中5个启动子未见启动GUS基因的表达,启动子S23P在烟草和水稻中都表现为组成型表达的特性,该启动子来自基因Os02g0752800,启动子S10P在水稻维管束启动了GUS基因的表达,该启动子来自基因Os01g0699100。